Question

16．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知控制蓝色色素合成的基因B．现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作错误的是（　　）

• A． 提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B
• B． 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
• C． 利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
• D． 将基因B导入农杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、要获得矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因B，可提取矮牵牛蓝色花mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增，A正确；
B、A、要获取真核生物的目的基因，一般采用人工合成法，B错误；
C、连接目的基因和运载体需要DNA连接酶，而不是DNA聚合酶，C错误；
D、将目的基因导入植物细胞时，常采用农杆菌转化法，即将基因B先导入农杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞，D正确．
故选：BC．

点评 本题以转基因玫瑰的培育为素材，考查基因工程及应用，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤，掌握基因工程的原理及应用，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲理解和应用层次的考查．