Question

【题目】根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

（1）限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。

（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________。

（3）按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

（4）反转录作用的模板是________,产物是________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。

（5）基因工程中除质粒外,________和________也可作为运载体。

Answer 1

【答案】黏性末端平末端切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同大肠杆菌T4mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR噬菌体动植物病毒

【解析】

基因工程的三种工具：限制酶、DNA连接酶和载体。限制酶存在于原核生物中，识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成的末端有黏性末端和平末端两种。DNA连接酶能将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，可分为E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶两大类，E.coli DNA连接酶只“缝合”黏性末端，T4 DNA连接酶黏性末端和平末端都可以“缝合”。载体能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点；具有标记基因，最常用的载体是质粒，另外，动植物病毒和λ噬菌体的衍生物也可作为运载体。载体可以携带外源DNA片段进入受体细胞。可在细胞中进行自我复制或整合到染色体DNA上随染色体DNA进行同步复制。

（1）限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端．
（2）两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同．因此为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同。

（3）DNA连接酶可分为两类：一类是T4 DNA连接酶，另一类是 E.coli DNA连接酶。
（4）反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用PCR技术进行大量扩增。
（5）基因工程中除质粒外，动植物病毒和λ噬菌体的衍生物也可作为运载体。