Question

14．我国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大．看似干净的洗衣机其实内部隐藏着一个健康的隐形杀手．某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验．如图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图．

（1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为倒平板，若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时，除考虑各种营养条件外，还要考虑温度、pH、氧气、无菌等和渗透压等条件（至少写两个）．
（2）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（3）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→E→D→C→F（用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是C（用字母表示）．
（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染．
（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为稀释涂布平板法．经一段时间培养后，该同学统计发现该培养皿中共有57个菌落（如图3），他得出的结论是0．lml菌液中有57个细菌，你认为他的判断是否正确，说明原因．不正确，应大于或等于57个细菌，因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．
（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是防止造成环境污染．

Answer 1

分析 分析图1：图示表示倒平板过程．
分析图2：平板划线操作：①挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种．②划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁，左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁），右手拿接种环先在A区划3-4条连续的平行线（线条多少应依挑菌量的多少面定）．划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果．在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方（不要放入皿盖内），以防止杂菌的污染．③划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线．再从B区作C区的划线．最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成．随即将皿底放入皿盖中．烧去接种环上的残菌．④等平板凝固后，将平板倒置．因此，正确的顺序为A→B→E→D→C→F．
分析图3：图3采用的是稀释涂布平板法．

解答 解：（1）图1所示是倒平板过程；若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时，除考虑各种营养条件外，还要考虑温度、pH、氧气、无菌等和渗透压等条件．
（2）检测固体培养基是否被污染的方法是：将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（3）图2是平板划线法接种操作示意图，由以上分析可知，其操作顺序是A→B→E→D→C→F；为了防止杂菌污染，接种应该在酒精灯的火焰旁进行，因此以上操作中存在错误的步骤是C．
（4）为了防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，需要将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置．
（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为稀释涂布平板法．采用该方法计数时，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此计数的结果比实际值偏小．
（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是防止造成环境污染．
故答案为：
（1）倒平板      温度、pH、氧气、无菌等
（2）将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生
（3）E→D→C→F       C
（4）防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染
（5）稀释涂布平板法        不正确，应大于或等于57个细菌，因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（6）防止造成环境污染

点评 本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法；识记无菌技术，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．