Question

【题目】心肌肌钙蛋白（cardiac troponin，cTn）是心肌肌肉收缩的调节蛋白。cTn是由三种不同的亚基组成：心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（TnC）。其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中的含量上升提示心肌损伤。为制备cTnI的单克隆抗体（简称单抗），科研人员进行了如下过程：

请回答下列相关问题。

（1）每隔两周需用cTnI作为抗原给小鼠注射一次，共注射三次，其目的是______________________________________，最后一次注射后的第三天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓细胞进行诱导融合，常用的生物诱导因素是__________________。

（2）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是__________________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选能产生________________的抗cTnI单抗的杂交瘤细胞。

（3）在体外培养杂交瘤细胞时，培养液中除了要加入营养物质外，还要置于一定的气体条件下，其中CO2的主要作用是____________________________。

Answer 1

【答案】加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞 灭活的病毒 乙和丙 特异性强、灵敏度高 维持培养液的pH

【解析】

1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。
3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。

（1）每隔两周用cTnI作为抗原给小鼠注射一次，共注射三次，其目的是增强免疫，刺激小鼠产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的生物诱导因素为灭活的病毒。

（2）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经过诱导融合后，可形成三种融合细胞和两种未融合的细胞，①过程是为了筛选获得杂交瘤细胞，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。看图可知：杂交瘤细胞需要对甲进行筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞。

（3）动物细胞培养时，加入CO2的主要作用是维持培养液的pH。