[题目]红细胞含有大量血红蛋白.红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的.血红蛋白的主要功能是携带 O2 或 CO2.我们可以选用猪.牛.羊或其他哺乳动物的血液进行实验.来提取和分离血红蛋白.根据材料回答下列问题: (1)a.b 均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因是 .(2)若选用 Sephadex G-100,则 G 表示 .(3)红细胞的洗涤过程� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带 O2 或 CO2。我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题：

(1)a、b 均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是_________,原因是_________。

(2)若选用 Sephadex G—100,则 G 表示__________。

(3)红细胞的洗涤过程中，离心速度过高和时间过长会使_________一同沉淀,达不到分离的效果。透析的原理是___________。

(4)有同学利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(图一)，他在操作中加样的正确顺序是________。

(5)图二、图三分别是不同的两位同学利用同一种样品分离得到的结果，则图三中与图二中蛋白质 P对应的是_________________。

【答案】a a 相对分子质量大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围白细胞和淋巴细胞小分子可以自由通过透析袋(半透膜)，而大分子不能通过 ④①②③ 丙

【解析】

据图可知，蛋白质a的相对原子质量大于b；琼脂糖凝胶电泳过程中，蛋白质由阴极向阳极运动，蛋白质的移动速率与其所带的电荷和相对分子质量的大小有关。

(1)图一代表凝胶色谱法分离蛋白质，大分子蛋白质a不会进入凝胶内部，在凝胶颗粒之间快速通过，路程较短,移动速度较快，最先先从层析柱中洗脱出来。

(2)Sephadex G—100中，G 表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。

(3) 白细胞和淋巴细胞中不含有血红蛋白，红细胞的洗涤过程中，离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，达不到分离的效果。透析时小分子可以自由通过透析袋(半透膜)，而血红蛋白不能通过，从而达到去除小分子蛋白质的目的

(4) 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。用吸管小心地将1mL透析后的样品加到色谱柱的顶端（图5-22），注意不要破坏凝胶面。加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内。等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。小心加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。顺序为④①②③。

(5)琼脂糖凝胶电泳过程中，在不考虑电荷差别的情况下，蛋白质的迁移的速率决定于其相对分子质量的大小，据图二可知，蛋白质P运动速度最快，说明其分子量最小，凝胶色谱分析过程中，分子量小的蛋白质运动速度最慢，洗脱时间最长，则图三中的丙与图二中蛋白质 P对应。

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