Question

【题目】人参是珍贵的药用植物，研究人员运用转基因技术构建乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统，为珍贵药用植物与疫苗联合应用开辟了新思路，其构建过裎如图所示，图中SmaⅠ、SstⅠ、EcoRV为限制酶。请回答相关问题：

（1）②的构建过程除限制酶外还需要_________酶；想要从②中重新获得HBsAg基因，所用的限制酶不能是EcoRV或SmaⅠ，原因是_____________________________。

（2）将重组质粒转入农杆菌常用__________处理細胞；要使目的基因成功整合到人参细胞的染色体上，该过程所采用的质粒应含有____________________。

（3）分析图可知，②中应含有的标记基因是_______________；过程⑤的目的是______________。

（4）该疫苗进入机体后可刺激机体产生能与乙肝病毒特异性结合的_____________，同时还能产生______使机体长期对乙肝病毒具有免疫力。

Answer 1

【答案】 DNA连接 两平末端连接后的重组序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ识别（重组质粒无这种限制酶的识别序列） 钙离子（Ca2+) T-DNA 氨苄青霉素抗性基因 筛选出含有HBsAg基因的人参细胞 抗体 记忆细胞

【解析】试题分析：本题主要考查基因工程、免疫调节。要求学生熟知基因工程的操作过程，尤其是限制酶的选择，以及体液免疫的过程。

（1）②为基因表达载体的构建，除需要限制酶外还需要DNA连接酶；EcoRV、SmaⅠ切割后得到的是平末端，然后用DNA连接酶连接后，所形成的重组序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ识别。

（2）将目的基因转入微生物的方法是钙离子处理細胞；农杆菌的质粒中含有一段可以转移的DNA，即T-DNA，它能将目的基因成功整合到人参细胞的染色体上。

（3）⑤过程中是将受体细胞放入氨苄青霉素中培养，以筛选出含有HBsAg基因的人参细胞，因此②中应含有的标记基因是氨苄青霉素抗性基因。

（4）在体液免疫中，疫苗可以刺激机体产生相应的抗体，同时还能产生记忆细胞使机体长期对乙肝病毒具有免疫力。