【题目】转染是指利用一定手段使外源基因进入细胞中并稳定表达的过程。腺病毒载体常用于外源基因的转染，这在基因治疗、疫苗研发和动物细胞培养的可视化监控方面有着广阔的应用前景。回答下列问题。
（l）腺病毒营____活，用作转染的腺病毒载体上具有____识别和结合的部位，是外源基因在受体细胞中启动表达的关键。
（2）构建腺病毒载体时，先用同种限制酶对腺病毒DNA和外源基因进行切割，可获得相同的____，再用DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的___。
（3）通过腺病毒载体将蓝色荧光基因转染山羊耳缘成纤维细胞，利用蓝色荧光直观监控细胞的体外培养过程。首先将山羊耳缘组织块用胰蛋白酶或_______处理得到单个成纤维细胞，培养至贴满瓶壁时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为________。这时，重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续进行 _______培养。培养时使用的合成培养基，通常需加入 ___等一些天然成分，以满足细胞对营养物质的全面需求。
【答案】寄生 RNA聚合酶 黏性末端或平末端 磷酸二酯键 胶原蛋白酶 细胞的接触抑制 传代 血清、血浆
【解析】
1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。构建基因表达载体时需要用同种限制酶切割目的基因和载体，以产生相同的末端，然后用DNA连接酶连接，恢复被切开的核苷酸之间的磷酸二酯键，RNA聚合酶能够与启动子识别并结合催化转录的进行，这是是外源基因在受体细胞中启动表达的关键。
2、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（1）腺病毒属于动物病毒，其无细胞结构，营寄生生活，必须寄生于宿主的活细胞中才能繁殖；用作转染的腺病毒载体上应具有RNA聚合酶识别和结合的部位启动子，这样才能驱动目的基因转录形成mRNA，最终合成相应的蛋白质。
（2）构建腺病毒载体时，先用同种限制酶对腺病毒DNA和外源基因进行切割，可以获得相同的黏性末端或平末端，再用DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）对山羊耳缘组织块用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理得到单个成纤维细胞，便于细胞与培养液充分接触；培养至贴满瓶壁时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制；这时重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续进行传代培养；由于人们对动物细胞培养所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此培养时使用的合成培养基，通常需加入血浆、血清等一些天然成分，以满足细胞对营养物质的全面要求。
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【题目】蜈蚣萍发达的根部结合有庞大的微生物群，可分解水中的有机污染。蜈蚣萍还能分泌有关物质促进水中单细胞藻类植物的叶绿素的分解，并覆盖在水体表面，从而减少了水华的发生。以下推论正确的是（ ）
A.监测水体的质量，可采用抽样检测法对藻类进行计数
B.蜈蚣萍主要通过竞争水和无机盐来抑制单细胞藻类生长
C.蜈蚣萍能净化有机污水，所以蜈蚣萍既是分解者也是生产者
D.单细胞藻类的主要作用在于加快了该生态系统的物质循环
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【题目】下列关于人体神经调节和体液调节的叙述，正确的是（ ）
A.体液调节与神经调节的反应速度并无明显差异
B.传入神经和传出神经都能以神经冲动的方式传导兴奋
C.下丘脑是调节生命活动的最高级神经中枢
D.神经调节和体液调节调节生命活动的基本方式都是反射
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【题目】下列关于正常人体内生理活动的叙述中，不正确的是（ ）
A.神经细胞释放的神经递质会使突触后神经元兴奋或抑制
B.某人脑损伤后看不懂自己熟悉的文字，是因为大脑皮层中的V区受损
C.胰岛素与胰高血糖素的靶细胞不可能相同
D.效应T细胞与靶细胞结合而导致靶细胞死亡属于细胞凋亡
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【题目】已知物种甲是某生态系统的某种动物。1949年，将100只某动物新物种乙引入该生态系统，之后的70年中，两物种种群数量变化如下表所示。下列相关叙述正确的是（ ）
时间（年） | 1949 | 1959 | 1969 | 1979 | 1989 | 1999 | 2009 | 2019 |
甲的种群数量（只） | 16200 | 16900 | 12200 | 9200 | 7100 | 7200 | 7100 | 7200 |
乙的种群数量（只） | 100 | 118 | 192 | 240 | 170 | 160 | 170 | 160 |
A.在引种初的4年内，新物种乙的种群数量呈“J”型增长
B.新物种乙的引入不会改变物种甲的环境容纳量
C.物种甲和物种乙可能为捕食关系
D.种群甲是引起种群乙的数量发生变化的唯一因素
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【题目】标志重捕法和样方法是调查种群密度的两种常用方法。下列有关说法不正确的是（ ）
A.随机取n个样方，每个样方的生物个体数量为x、x…xn，则样方内生物个体数量的平均值为（x1+x2…+xn） /n
B.调查大多数哺乳动物种群密度时一般采用标志重捕法
C.计数时，同种生物个体无论大小都要计数
D.标志重捕法中种群数量的估算公式是：标记个体数/种群数量=重捕个体数/重捕标记数
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【题目】人体维持内环境的相对稳定对细胞的正常生命活动非常重要。下列说法正确的是（ ）
A.生命系统的各个层次上，都普遍存在着稳态现象
B.细胞依赖于内环境，并不参与内环境的形成与维持
C.内环境中发生的丙酮酸氧化分解能为细胞提供能量有利于生命活动的进行
D.稳态是机体通过调节作用，使各个器官系统的协调活动共同维持的恒定状态
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【题目】林场中的林木常遭到某种山鼠的危害。通常，对于鼠害较为严重的林场，仅在林场的局部区域（苗圃）进行药物灭鼠，对鼠害的控制很难持久有效。回答下列问题：
（1）用标志重捕法调查该种山鼠种群密度，若林场面积为4km2，初次捕获山鼠120只并标 记，放回一段时间后，再次捕获山鼠100只，其中被标记的山鼠数量为30只，则该林场生 态系统中山鼠的种群密度是_____ 只/km2。若部分标志物在山鼠放回后脱落，则会 导致测量值比实际值 _____（填“偏大”或“偏小”）。
（2）在自然条件下，山鼠种群的增长曲线呈_____ 型。
（3）在苗圃进行了药物灭鼠后，如果出现种群数量下降，除了考虑药物引起的死亡率升高这一因素外，还应考虑的因素是_____。理论上，除药物灭鼠外还可以采用生物防治的方法控制鼠害，如引入天敌，天敌和山鼠之间的种间关系是____。引入天敌控制山鼠与用药物灭鼠相比，其突出优点是__________。
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