Question

（10分）研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图12所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建___________区基因，转入原核细胞表达并提纯。
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是______________，细胞融合的原理是_________________。
（3）将融合细胞在__________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_______________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。
（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

Answer 1

（1）低表达   胞外
（2）骨髓瘤     PEG（或“聚乙二醇”）   细胞膜的流动性
（3）选择       抗原-抗体杂交
（4）体外（培养）
（5）特异性强（或“识别抗原部位专一”）

解析试题分析：⑴根据题意可知，原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中 低表达；根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因 ⑵在制备单克隆抗体过程中，需要将脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合，诱导其融合的试剂为聚乙二醇，其融合的原理是借助于细胞膜的流动性 ⑶将融合细胞接种在选择培养基中，从中选出杂交瘤细胞，利用抗原—抗体杂交技术最后选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞 ⑷将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养，获得大量的单克隆抗体 ⑸单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高
考点：本题主要考查单克隆抗体，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。