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    基因工程是现代生物技术的核心．请阅读下文，分析回答下列问题
    正常细胞中含有抑癌的P53基因，能表达抗病毒蛋白，帮助修复轻度变异的基因，也能使重复变异的细胞发生凋亡而避免肿瘤的发生；若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤．基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体．野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1，因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒．图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点．

    （1）DNA解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的
     
    键（化学键）；DNA限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的
     
    键（化学键）．
    （2）构建重组腺病毒时，限制酶最好选择，理由是：
     
    ．既可以去除
     
    基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏
     
    基因以防止其
     
    ．
    （3）将目的基因与腺病毒重组时，重组的成功率较低，依然还有大量非重组的野生型病毒的DNA，这是因为
     
    ．
    （4）要获得更多重组病毒，采用的方法是：获取人体某肿瘤细胞→将E1基因导入肿瘤细胞的基因组中→重组病毒侵染含E1基因的肿瘤细胞→体外培养侵染的细胞．该过程中利用肿瘤细胞能不断复制的特点可以为病毒提供更多的生活场所，那么选用含E1基因的肿瘤细胞进行重组病毒侵染的理由是
     
    ．筛选重组病毒，可采用离心分层纯化法，其依据是
     
    ．
    （5）某DNA分子片段含有1000个碱基对．经扩增后，分别只用限制酶EcoRⅠ与同时用EcoRⅠ和HalⅢ两种方法切割，其电泳结果如图丙所示，可推断限制酶HalⅢ在该DNA片段上的切点有
     
    个．
    （6）如果需将目的基因利用PCR技术扩增10次，则需要在缓冲液中至少加入
     
    个引物．
    A．210          B． 210+2       C．211       D．211-2．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：分析题图：图甲为野生型腺病毒DNA，其中含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1，因此构建基因表达载体时应破坏或去除55Kda基因和基因E1；图乙为人体DNA片段，其中P53基因为目的基因．要获得目的基因（P53基因），同时还要破坏或去除55Kda基因和基因E1，应选用EcoRI和BamHI切割载体和含有目的基因的DNA．
    解答： 解：（1）DNA解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的氢键；DNA限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键．
    （2）根据题干信息“野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1”可知，构建基因表达载体时，应选用EcoRI和BamHI切割载体和含有目的基因的DNA，这样既可以去除E1基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏55Kda基因以防止其抑制P53基因的活性．
    （3）由于切下片段有可能与原基因重新结合，因此将目的基因与腺病毒重组时，重组的成功率较低，依然还有大量非重组的野生型病毒的DNA．
    （4）选用含E1基因的肿瘤细胞进行重组病毒侵染，可以让病毒仅在含有E1基因的肿瘤细胞中复制，而在不含E1的人体正常细胞中不能复制，提高安全性．重组病毒与非重组病毒的DNA分子长度不同，质量（密度）也不同，因此筛选重组病毒时，可采用离心分层纯化法．
    （5）只用限制酶EcoRI切割能产生700kb、200kb和100kb三种长度的DNA片段，同时用EcoRI和HalⅢ两种酶切割可产生420kb、280kb和100kb三种长度的DNA片段，可见，限制酶HalⅢ又将长度为700Kb的DNA片段切成420kb和280kb两段，将长度为200kb的DNA片段切成100kb的两段，由此可推断限制酶HalⅢ在该DNA片段上的切割位点有2个．
    （6）利用PCR技术将目的基因扩增N次，至少需要的引物2N+1-2个．
    故答案为：
    （1）氢     磷酸二酯键
    （2）BamHI和ECORI       E1        55kda        抑制P53基因的活性
    （3）DNA对所连接的DNA片段没有选择性，导致切下片段可能和原DNA连接
    （4）可以让病毒仅在含E1基因的肿瘤细胞中复制；而在不含E1基因的人体正常细胞中不能复制，提高安全性 重组病毒和非重组病毒分子量不同
    （5）2
    （6）D
    点评：本题结合图解，考查基因工程的技术和原理，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能根据图甲和图乙中的限制酶分布位点及题干信息“野生型腺病毒含有抑制P53基因活性的55Kda基因，以及病毒复制基因E1”选择合适的限制酶；能根据电泳结果图推断限制酶HalⅢ切割位点数目．
    练习册系列答案
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    相关习题

    科目：高中生物 来源： 题型：

    Ⅰ．某雌雄同株植物花的颜色由两对基因（ A和a，B和b）控制，A基因控制色素合成（A：出现色素，AA和Aa的效应相同），B为修饰基因，淡化颜色的深度（B：修饰效应出现，BB和Bb的效应不同），其基因型与表现型的对应关系见下表，请回答下列问题：
    基因型A BbA bbA BB或aa
    表现型粉色红色白色
    （1）．若不知两对基因（A和a，B和b）是在同一对同源染色体上，还是在两对同源染色体上，某课题小组选用了AaBb粉色植株自交进行探究．
    ①实验假设：这两对基因在染色体上的位置存在三种类型，请你在下图的图示方框中补充其他两种类型（用竖线表示染色体，黑点表示基因在染色体上的位点）．
     

    ②实验方法：粉色植株自交；
    ③实验步骤：
    第一步：粉色植株自交；
    第二步：观察并统计子二代植株花的颜色和比例．
    ④实验可能的结果（不考虑交叉互换）及相应的结论：
    a．
     
    ，两对基因在两对同源染色体上，（符合上图第一种类型）；
    b．
     
    ，两对基因在一对同源染色体上，（符合上图第二种类型）；
    c．若子代植株花粉色：红色：白色=2：1：1，两对基因在一对同源染色体上，（符合上图第三种类型）．
    （2）．若上述两对基因的遗传符合自由组合定律，则粉色植株自交后代中：
    ①子代白色植株的基因型有
     
    种，白花植株中a的基因频率是
     
    （用分数表示）．
    ②子代红花植株中杂合体出现的几率是
     
    ，若对杂合的红花植株幼苗用秋水仙素处理，那么形成的植株为
     
    倍体．
    Ⅱ．雌雄异株的高等植物剪秋萝有宽叶、窄叶两种类型．某科学家在研究剪秋萝叶形性状遗传时，做了如下杂交实验：
    杂交（组）亲代子代
     雌雄雌雄
    1宽叶窄叶无全部宽叶
    2宽叶窄叶无 1/2宽叶、1/2窄叶
    3宽叶宽叶全部宽叶1/2宽叶、1/2窄叶
    据此分析回答：
    （1）根据第
     
    组杂交，可以判定
     
    为显性遗传．
    （2）根据第
     
    组杂交，可以判定控制剪秋萝叶形的基因位于
     
    染色体上．
    （3）若让第3组子代的宽叶雌株与宽叶雄株杂交，预测其后代的宽叶与窄叶的比例为
     
    ．
    （4）第1、2组后代没有雌性个体，最可能的原因是
     
    ．
    （5）为进一步证明上述结论，某课题小组决定对剪秋萝种群进行调查．你认为调查的结果如果在自然种群中不存在
     
    的剪秋萝，则上述假设成立．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    微生物培养
    幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素．幽门螺杆菌的尿素酶极为丰富，约含菌体蛋白的15%，尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：
    配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察．请回答：
    （1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有
     
    ，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现
     
    色环带．
    （5）下列对培养基进行灭菌的最适方法是
     
    灭菌．
    A．高压蒸汽  B．紫外灯照射  C．加入适量的广谱抗生素  D．过滤
    （3）步骤X表示．在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液
     
    到培养基平面上．菌液稀释的目的是为了获得
     
    菌落．
    （4）在培养时，需将培养皿倒置并放在中．若不倒置培养，将导致
     

    （5）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的
     
    分解为NH3和14CO2．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图是内环境稳态调节机制图，a为物质，b、c、d为信息分子．请据图回答以下问题：
    （1）图中b为
     
    ，它通过与
     
    上的受体结合而引发动作电位的产生，当动作电位产生时，膜内的电位变化为
     
    ．
    （2）若a仅在体液免疫中发挥作用，则a表示
     
    ，分泌它的细胞是
     
    ，此细胞可由
     
    或
     
    分化而来．
    （3）餐后参与调节的信息分子c主要为
     
    ，其生理作用是
     
    ．
    （4）若d表示促甲状腺激素，则其分泌受
     
    激素的调节，而d参与的激素分泌过程存在着分级调节和
     
    调节机制．
    （5）较长时间处于寒冷环境中时，人的体温仍会维持相对稳定，这是
     
    达到动态平衡的结果，与炎热环境下相比，此时人体内的抗利尿激素的分泌量应该是
     
    （增加、减少或不变）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列有关基因表达和基因工程问题
    人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因奶牛的乳汁中获得．图1表示利用奶牛乳汁生产人组织纤溶酶原激活物的培育过程：
    （1）在形成图中③的过程中，获取②的途径主要有
     
    ，②进入③需要
     
    的协助．
    （2）为了在该奶牛乳汁中获得htPA必须将htPA基因连接在
     

    A．乳腺蛋白基因的转录起始位点之后    B．乳腺蛋白基因的转录起始位点之前
    C．起始密码子编码序列之后           D．乳腺蛋白基因的转录终止位点之后
    （3）培养从③到④的过程中一般用未受精的去核卵细胞为受体，不用普通的体细胞的原因是
     
    ．
    （4）⑦与⑥的遗传性状不一样的理由是
     
    ．
    （5）图2为质粒限制酶酶切图谱．htPA基因不含图中限制酶识别序列．为使PCR扩增的htPA基因重组进该质粒，扩增的htPA基因两端可分别引入
     
    和不同限制酶的识别序列．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    感染埃博拉病毒的患者在清除体内埃博拉病毒的过程中，不一定参与的是（　　）
    A、记忆细胞B、吞噬细胞
    C、浆细胞D、效应T细胞

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    免疫
    实验一：用不带特殊病原体的小鼠进行如下特异性免疫实验，过程如图①，结果如图②．

    （1）实验中，对B组小鼠的处理是作为A组小鼠的
     
    处理．
    （2）从图1-②可知，Ⅱ组与Ⅳ组相比，小鼠脾脏中的活细菌数量的增长趋势
     
    ，说明血清中的
     
    不能有效抑制脾脏内的细菌繁殖．注射来自于A组小鼠的T细胞后，在4天内Ⅰ组小鼠脾脏中的活细菌数量
     
    ，说明该组T细胞（活化T细胞）
     
    细菌数量的增长．由此推测该细菌生活在
     
    ．
    （3）实验中，Ⅰ～Ⅳ组小鼠感染的是
     
    ，感染的时间是在注射T细胞或血清的
     
    天．
    实验二：在体外观察小鼠的T细胞和巨噬细胞（一种吞噬细胞）对细菌X的杀伤力，结果如图2．
    （4）由图2可知，能有效杀伤细菌X的是
     
    细胞，而不是活化T细胞．
    （5）有人假设，活化T细胞释放某种物质活化了巨噬细胞．若用体外实验验证该假设，实验组应选择的实验材料包括
     
    （填选项前的符号）．
    a．培养过活化T细胞的培养液      b．培养过巨噬细胞的培养液
    c．A组小鼠的巨噬细胞           d．B组小鼠的巨噬细胞
    e．培养过未活化T细胞的培养液    f．细菌X
    （6）该系列实验的目的是研究
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列关于信息传递和自稳态调节的相关问题
    下列甲、乙、丙、丁四图表示某高等动物的调节机制．图中的A～H表示结构或细胞，a～e表示物质．据图分析：

    （1）图甲中的B代表胰岛B细胞，A通过释放“某化学物质”可直接影响激素①的合成与分泌，这种调节方式属于
     
    ．若图甲中的激素②为甲状腺激素，则a是
     
    ．激素②含量增加到一定程度时，对a和b的分泌起抑制作用，这种调节机制称为
     
    ．
    （2）糖尿病病因之一是由于患者血液中存在某些异常抗体，如图乙中的抗体1、抗体2，其中因抗体引起的糖尿病可以通过注射胰岛素来治疗，这种抗体的致病机理是
     
    ．
    （3）图甲中的A结构中每个活的神经细胞都能完成的生理活动有
     
    ．
    ①兴奋的产生与反射的完成　　　　②细胞的增殖与分化
    ③代谢中产生水与消耗水     　　④遗传信息的传递和表达
    （4）图丙为图甲中C所代表甲状腺及相关生理活动示意图，据图可推断其中E细胞在图示过程中的功能为
     
    ．若某个体产生针对激素b受体的抗体，而该种抗体能发挥与激素b相同的生理作用，但激素②不会影响该抗体的分泌，则与正常个体相比，该个体的体温会
     
    ．
    （5）图丁是结构A中部分结构的放大．刺激H处，会导致图丁中的
     
    释放兴奋性递质，最后导致①膜外的电位发生了
     
    变化．
    （6）信息传递过程中，靶细胞上的受体其化学本质是
     
    ，根据受体所在细胞位置可分为三种（如图甲示意）．如突触结构中，神经递质（化学信息）作用的靶细胞受体根据其位置属于
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    图中①、②、③、④分别表示不同的变异类型，其中图③中的基因2由基因1变异而来．下列有关说法正确的是（　　）
    A、图中①②都表示易位，发生在减数第一次分裂的前期
    B、图中③中的变异属于染色体结构变异中的缺失
    C、图中④中的变异属于染色体结构变异中的缺失或重复
    D、图中4种变异能够遗传的是①③

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