【题目】P450是石油降解的关键酶。用SalI和NdeI联合酶切获得P450基因，与甲图所示的质粒重组后，导入大肠杆菌中获得基因工程菌。甲图中mel基因表达能使白色菌落变成黑色，aacCI是庆大霉素（抗生素）抗性基因。甲图中箭头位置是不同限制酶的切割位点，乙图表示几种限制酶对应的识别序列及切割位点。回答下列问题：
(l)甲图所示质粒中没有Sal I酶的切割位点，切割质粒时可用乙图中的____酶代替，原因是____。酶切后的质粒与目的基因（P450基因）在____酶的作用下形成重组质粒。
(2)经测定图甲质粒长度为7.6kb(lkb为1000个碱基对)，重组质粒经Nde I、SspI联合酶切后获得了6．0kb和1.2kb的两个片段，据此推测，目的基因的长度应为____kb。基因表达载体中必须含有启动子，它的作用是____。
(3)将重组质粒导人大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种____的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。由于重组质粒导入受体细胞的成功率很低，需要接种到含有_____的固体培养基上，选择颜色为____的菌落扩大培养，进而筛选出所需的工程菌。
【答案】Xho I Sal I和XhoI作用于原质粒所产生的粘性末端相同 DNA连接 1.4 RNA聚合酶识别并结合位点 能吸收周围环境中DNA分子 庆大霉素 白色
【解析】
本题考查基因工程，考查对限制酶作用、基因工程操作步骤的理解。根据图甲中标记基因位置和图乙中各种限制酶切点可判断目的基因的插入位置，根据标记基因是否表达可筛选含有重组质粒的受体细胞。
(l)甲图所示质粒中没有SalI酶的切割位点，切割质粒时可用乙图中的Xho I酶代替，二者作用后可形成相同的黏性末端。酶切后的质粒与目的基因（P450基因）可在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。
(2)图甲质粒长度为7.6kb(lkb为1000个碱基对)，据图甲可知，用Xho I和NdeI联合酶切处理质粒，去除的片段应为1.8kb，剩余的DNA片段为5.8kb，重组质粒经Nde I、SspI联合酶切后获得了6．0kb和1.2kb的两个片段，说明重组质粒长度为6.0+1.2=7.2kb，则目的基因的长度应为7.2—5.8=1.4kb。基因表达载体中启动子是RNA聚合酶的结合部位，可以启动转录过程。
(3)将重组质粒导人大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞壁的通透性增大，使之容易吸收周围环境中DNA分子。据图可知，目的基因的插入会破坏mel基因，但不会破坏庆大霉素（抗生素）抗性基因，因此可将受体细胞接种到含有庆大霉素的固体培养基上，含有重组质粒的大肠杆菌形成的菌落不会变成黑色，但具有庆大霉素抗性，选择颜色为白色的菌落扩大培养，可筛选出所需的工程菌。
同步练习强化拓展系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】某动物细胞的甲、乙、丙三种细胞器，测定其中三种有机物的含量如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A.真核细胞中都含有细胞器甲
B.乙一定与分泌蛋白的加工修饰有关
C.细胞中丙的数量越多，则核仁体积越大
D.酵母菌与该细胞共有的细胞器只有丙
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【题目】肥胖是引发糖尿病的危险因素之一。肥胖糖尿病患者多会发生心血管并发症。
（1）胰岛素作为________分子调节血糖含量。健康人血糖浓度升高时，______细胞分泌的胰岛素增加。胰岛素与靶细胞膜上的受体结合后，激活细胞内的信号通路，促进血液中的葡萄糖进入细胞。葡萄糖在细胞中通过______过程释放能量，也可合成糖原或转化为_________。
（2）已有研究发现物质A与肥胖糖尿病患者心血管疾病的发生有关。为研究物质A的作用,科研人员分别在不同培养基中培养大鼠正常心肌细胞，用适量胰岛素处理后进行测定，结果如图1。
实验中使用高糖高脂培养基模拟的是_________。
实验结果说明物质A的作用是____________________。
（3）图2所示为胰岛素调节的主要信号通路。为进一步研究物质A的作用机制，科研人员检测了上述实验中高糖高脂培养基中细胞内相关物质含量，结果如图3。综合图2 和图3可知，物质A影响胰岛素作用的机制是________。
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【题目】如图为生态系统中碳循环的部分示意图，下列说法不正确的是( )
A. 物质循环伴随着能量的流动B. 能完成该循环的生物一定含有叶绿体和线粒体
C. a、b所示的物质循环具有全球性D. 进行a过程的生物是自养型生物
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【题目】若高致病性禽流感病毒H5N1侵入人体后可发生如图所示的免疫反应（A、B为有关物质），下列各种分析正确的是 （ ）
A. 禽流感病毒H5N1侵入机体后，T细胞的细胞周期可能会变短
B. A物质为抗体，最终将禽流感病毒H5N1清除
C. T细胞成熟于骨髓，它可分化成记忆T细胞和效应T细胞
D. 效应T细胞与靶细胞密切接触依赖B物质，B物质的化学本质是脂质
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【题目】科学家研究小麦20℃时光合作用强度与光照强度的关系，得到曲线，下列有关叙述不正确的是
A.随着环境温度的升高，cd段位置不断上移
B.a点时叶肉细胞产生ATP的细胞器只有线粒体
C.其他条件适宜，当植物缺Mg时，b点将向右移动
D.外界条件均适宜时，c点之后小麦光合作用强度不再增加可能与叶绿体中酶的数量有关
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【题目】细胞具有多样性和统一性，如图所示的是几种常见的单细胞生物结构示意图。下列叙述正确的是（ ）
A.图中各细胞都有两种核酸
B.具有核膜、核仁的细胞是①②③
C.②③④⑤是异养型生物
D.具有细胞壁的细胞是①④⑤
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【题目】某野外调查小组在我国东部地区对东部群落进行深入调查，获得下面有关信息资料。请分析回答：
（1）调查获得了树林中物种数与面积的关系图（如图1），调查该地区物种数的样方面积最好是_____________。区别不同群落的重要特征是_______________。
（2）东部群落在空间结构上具有_____________ 结构。在人工干预下，该生态系统的生物种类逐渐增多，这属于群落的____演替。
（3）上图3是调查小组同学从当地主管部门获得的某物种种群数量的变化图，据此分析该种群在30年中，种群数量最少开始于第___________年，第15～20年间种群的年龄组成类型是____________，第20～30间种群的增长率为______。
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【题目】已知果蝇的翅型同时受位于Ⅱ号和Ⅳ号染色体上两对等位基因(G、g和F、f)控制，基因与性状的关系如下图。请据图回答下列问题：
(1)由图说明生物性状与基因数量的关系是___________________。雄果蝇的一个染色体组是___________________________。
(2)果蝇的翅型遗传符合孟德尔遗传规律中的_________________定律，可以选择基因型为___________________的果蝇作为亲本组合来验证这一结论。
(3)某同学对果蝇的翅型进行了调查，并绘制遗传系谱图如下：若1号和2号都是纯合子，则3号基因型是_____________。让4号与5号个体多次交配并产生足够多的后代(F1)，则后代(F1)基因型和表现型的种类数分别为______________。让7号与3号个体交配，则产生的子代中基因型与3号相同的概率是___________。
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