Question

9．回答下列有关基因工程的问题．
苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（apm^r为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．

（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是C
A．             B．         C．   D． （2）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生4种DNA片段，②过程可获得2种重组质粒．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得2种重组质粒．
（3）该过程中Bt毒素蛋白基因插入质粒后，不应影响质粒的ABD（多选，2分）
A．复制B．转录C．碱基对的数量D．抗性基因的表达
（4）此基因工程中大肠杆菌质粒的作用是作为运载体与Bt毒素蛋白基因重组，根瘤农杆菌的作用是感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内．生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的抗Bt毒素蛋白基因的基因频率的增长速率．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程，其中①是含有目的基因的外液DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位点，且BamHⅠ和BstⅠ的识别序列相同；②表示基因表达载体的构建过程．③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程；④表示目的基因的表达．

解答 解：（1）由HindⅢ酶识别序列为切后，因此，得到DNA片段的末端是．
（2）图①中，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割质粒可形成两种长度不同的片段，因此用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种；而BamHⅠ切割质粒只能形成一种长度的片段，但可能会出现正向和反向连接，所以用DNA连接酶能连接形成2种重组质粒．
（3）质粒要能进行复制才能得到更多的表达产物，所以构建基因表达载体后，不能影响质粒的复制、表达和抗性基因的表达．
（4）大肠杆菌质粒可作运载体，与与Bt毒素蛋白基因重组形成基因表达载体．根瘤农杆菌可以感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内，即农杆菌转化法．转基因与非转基因作物混种，可降低抗性作物对害虫的选择性，使害虫种群中的抗性基因频率增长率减慢．
故答案为：
（1）C
（2）4     2    2
（3）ABD
（4）作为运载体与Bt毒素蛋白基因重组         感染植物，将Bt毒素蛋白基因转入植物细胞内    抗Bt毒素蛋白

点评 本题结合转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程图，考查基因工程、酶、生物进化等相关知识，要求考生识记基因工程的相关知识点，能根据图中质粒和外源DNA分子上的酶切位点，解答第（1）（2）题；还要考生识记酶的特性，掌握生物进化的相关知识．