Question

8．内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系．研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ET_A有关，科研人员通过构建表达载体，实现了ET_A基因在细胞中高效表达．其过程如下（图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC^↓GGG，限制酶XhoⅠ的识别序列为C^↓TCGAG）．据图回答下列问题：

（1）图中ET_A基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是所有生物共用一套遗传密码．
（2）过程①中需要用逆转录酶处理，过程③中，限制酶XhoⅠ切割DNA形成的黏性末端是-AGCT（或）．用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是使目的基因定向连接到载体上（避免目的基因及载体的任意连接）．
（3）图中的基因表达载体至少还缺少终止子，鉴定ET_A基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的ET_A基因作探针．
（4）已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量．因此，利用SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，目的是检测ET_A基因能否表达及表达量．
（5）人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体，内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后，会刺激黑色素细胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性，从而使黑色素增加．美容时可以利用注射ET_A达到美白祛斑效果，原因是ET_A能与内皮素结合（减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合），从而抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成．

Answer 1

分析 分析图形：1、2、3过程表示反转录法获得目的基因的过程，4表示基因表达载体的构建过程，5表示利用限制酶切割质粒的过程，6表示将重组质粒导入受体细胞的过程，7表示目的基因的检测，以此分析答题．

解答 解：（1）自然界中所有生物共用一套遗传密码子，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达．
（2）①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化；③是利用限制酶XhoⅠ切割DNA获得目的基因的过程，由于限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG，因此其切割形成的黏性末端是-AGCT（或）．图中显示利用了两种限制酶切割目的基因和载体，从而获得了不同的黏性末端，这样可以防止目的基因与运载体反向连接，即可以使目的基因定向连接到载体上．
（3）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等，图中的基因表达载体至少还缺少终止子；鉴定ET_A基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的ET_A基因作探针．
（4）利用SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，可以检测ET_A基因能否表达及表达量．
（5）ET_A能与内皮素结合，减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合，抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成，从而达到美容的目的．
故答案为：
（1）所有生物共用一套遗传密码
（2）逆转录-AGCT（或）    使目的基因定向连接到载体上（避免目的基因及载体的任意连接）
（3）终止子      ET_A基因
（4）检测ET_A基因能否表达及表达量
（5）ET_A能与内皮素结合（减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合）

点评 本题结合转基因香蕉形成的流程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，能结合图中信息准确答题．