Question

18．真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制．已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）．回答下列问题：
（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，从CDNA文库中也获取了基因A．上述从cDNA文库获得的基因A不含内含子．
（2）若用家蚕作为表达基因A的受体，在质粒、噬菌体和昆虫病毒三种载体中，不可选用噬菌体作为载体．
（3）若要检测基因A是否转录出mRNA，可用的检测物质是蛋白A的抗体（填蛋白A？蛋白A的抗体？同位素标记的基因A）．
（4）早期基因工程都用原核细胞作受体细胞，因其为单细胞、繁殖快、容易培养、遗传物质相对较少．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因组文库含有该生物的全部基因，而cDNA文库是由mRNA逆转录形成的，其中不含启动子、内含子等结构．
（2）噬菌体只能侵染细菌，因此若用家蚕作为表达基因A的受体，在质粒、噬菌体和昆虫病毒三种载体中，不可选用噬菌体作为载体．
（3）若要检测基因A是否转录出mRNA，可用分子杂交技术，即用探针（同位素标记的基因A）与受体细胞的mRNA进行杂交，若出现杂交带则已经转录．
（4）早期基因工程都用原核细胞作受体细胞，因其为单细胞、繁殖快、容易培养、遗传物质相对较少．
故答案为：
（1）cDNA文库
（2）噬菌体
（3）同位素标记的基因A
（4）繁殖快、容易培养

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．