Question

【题目】动物细胞培养技术有很多用途，如生产分泌性蛋白药物、检测有毒物质、获得大量自身健康细胞等。某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。请根据下列有关动物细胞培养实验回答相关问题：

（1）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是______________。

（2）随着细胞分裂增殖次数的增多，绝大部分细胞停止分裂，极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成特殊细胞，该种细胞的结构特点为________________________________。

（3）实验中可以通过观察细胞的畸变率来确定物质毒性的大小。某有机物X，其毒性可诱发染色体断裂。利用下图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物X溶液等。实验过程如下：

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作（“√”表示已完成的步骤）。

	甲	乙	丙	丁
步骤一：加入肝脏培养液	√	√	√	√
步骤二：加入有机物X溶液	√		√
步骤三：放置肝脏小块	√

上表中的步骤还未完成，还需进行的操作是_______________________________。

③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片，在显微镜下观察_____________________，并对比分析，最好选用细胞分裂到________期时进行观察。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明__________________________________。

Answer 1

【答案】人们对细胞所需营养物质成分不明确，血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 变为球形，细胞膜表面糖蛋白的量减少 向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 中 肝脏小块对有机物X具有解毒作用

【解析】

1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

2、动物细胞培养的条件：

（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。

（1）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是人们对细胞所需营养物质成分不明确，血清可以补充合成培养基中缺乏的物质。

（2）随着细胞分裂增殖次数的增多，绝大部分细胞停止分裂，极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成特殊细胞，该种细胞的结构特点为变为球形，细胞膜表面糖蛋白的量减少。

（3）②为了排除是肝脏培养液或是肝脏小块对实验的影响，应向乙或丁装置中放置肝脏小块。

④有机物X有毒性，可诱发染色体断裂，所以一段时间后要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化；有丝分裂中期染色体的形态和数目比较清晰，所以最好选用细胞分裂的中期时进行观察；甲组添加肝脏小块，淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加，出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。