Question

【题目】长春花植物中含有复杂的生物碱，其中长春花碱是目前应用最广泛的天然植物抗肿瘤药物之一，提取方法如下：长春花干燥粉碎→纤维素酶处理→加入pH为4.0的酸中→恒温水浴→加碱调pH至8.0→四氯化碳萃取。回答下列问题：

（1）纤维素酶是一类复合酶，包括____________，实验室常用________________________ 法鉴别微生物是否产生纤维素酶。

（2）长春花干燥粉碎后再用纤维素酶处理的原因是________________________。

（3）长春花碱微溶于水，易溶于酸中，由此推测，后续提取加碱的目的是_______________________。

（4）本实验中纤维素酶在不同pH和温度处理后，提取得到的长春花碱含量如图所示，a、b、c曲线最大值对应的温度均为50℃，原因是________________________，长春花碱粗品的鉴定方法是____________。

Answer 1

【答案】 C1酶，Cx酶，葡萄糖苷酶 刚果红染色 增大纤维素与纤维素酶的接触面积，提髙纤维素的降解率 让溶解于酸中的长春花碱析出 在不同pH条件下，纤维素酶的最适温度均为50℃ 纸层析法

【解析】

微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，包括Cx酶、C1酶和葡萄糖苷酶，Cx酶作用于无定型的纤维素区域，使纤维素断裂成片段；C1又叫纤维二糖水解酶，它可以作用于纤维素的结晶区或小片段纤维素，从糖链末端开始切掉两个葡萄糖分子，产生纤维二糖；葡萄糖苷酶则将纤维二糖分解成葡萄糖。刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

（1）根据以上分析已知，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；由于刚果红可以与纤维素产生红色络合物，而水解产物不能，因此实验室常用刚果红染色法鉴别微生物是否产生纤维素酶。

（2）长春花干燥粉碎后再用纤维素酶处理，可以增大纤维素与纤维素酶的接触面积，提髙纤维素的降解率。

（3）长春花碱微溶于水，易溶于酸中，所以实验步骤中“加碱调pH至8.0”的目的是让溶解于酸中的长春花碱析出。

（4）在不同pH条件下，纤维素酶的最适温度均为50℃，所以图中a、b、c曲线最大值对应的温度均为50℃；长春花碱粗品的鉴定一般采用纸层析法。