Question

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平．下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
（1）过程①必需用到的酶是

 

．
（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和

 

才能构成一个完整的基因表达载体．
（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是

 

．然后还要通过

 

技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上．
（4）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射

 

的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到

 

期即可通过显微操作将其细胞核去除．
（5）早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、

 

等物质．
（6）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于

 

生殖．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：①是目的基因获取，②是基因表达载体的构建，③是将目的基因导入受体细胞，④⑤⑥是核移植过程，⑦是早期胚胎培养，⑧是胚胎移植过程．

解答： 解：（1）获取目的基因的工具酶是限制酶．
（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．
（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术，并用DNA分子杂交技术检测转基因生物DNA上是否插入目的基因．
（4）注射促性腺激素可促进超数排卵，卵母细胞达到减数第二次分裂中期时，才具备受精的能力，此时的细胞可进行核移植．
（5）早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质．
（6）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程利用了核移植技术，属于无性生殖．
本题答案：
（1）限制性核酸内切酶（限制酶）    
（2）标记基因
（3）显微注射技术    DNA分子杂交
（4）促性腺激素   减数分裂第二次分裂中期
（5）氨基酸、核苷酸、血清
（6）无性

点评：本题通过转基因猪的获得过程来考查基因工程和胚胎工程，主要考查对知识的记忆和对图示的理解．