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20.已知植物细胞内的H2PO4-浓度是细胞外的一万多倍,一定浓度的HgCl2溶液可阻断ATP的水解.为了验证植物细胞对H2PO-的吸收方式是主动运输,某研究小组做了如下实验.取某品种的成熟白萝卜(A)和幼嫩白萝卜(B),将其中间部分切成边长为2cm的正方形薄片,分别浸泡于蒸馏水中,泵入空气24h,备用.取4个锥形瓶,标记为甲、乙、丙、丁,按下表所列步骤进行实验:
步骤
①加入一定浓度的KH2PO4溶液10mL10mL10mL10mL
②加入蒸馏水10mL/10mL/
③加入一定浓度的HgCl2溶液/10mL/10mL
④测定初始浓度(S)测定各锥形瓶中KH2PO4的浓度
⑤分别加入A或B的切片各20片AABB
⑥24h后,测定终末浓度(T)测定各锥形瓶中KH2PO4的浓度
⑦计算各瓶KH2PO4浓度差值(S-T)9.1804.0442.6741.003
注:表格中“/”表示不加入.
上述实验重复5次,计算平均值,结果见步骤⑦.回答下列问题:
(1)实验结果表明,甲组萝卜切片吸收KH2PO4的数量最多. 
(2)通过比较甲、乙(或丙、丁)组的实验数据,可推知植物细胞对KH2PO4的吸收是通过主动运输方式进行的,判断的理由是乙组(丁组)加入HgCl2溶液阻断ATP水解过程后,细胞对KH2PO4的吸收量比甲组(丙组)显著减少,由此判断细胞吸收H2PO4需要消耗能量(ATP),属于主动运输.
(3)成熟组织吸收KH2PO4的能力大于幼嫩组织,其原因可能是①成熟组织细胞膜转运H2PO4-的载体蛋白的数量_比幼嫩组织细胞膜上的多;②成熟组织细胞的呼吸作用较旺盛.若要进一步探究呼吸作用强度与线粒体数量的关系,可将成熟组织与幼嫩组织用健那绿染色,制成临时装片,在显微镜下可以观察到被染成蓝绿色的线粒体.通过比较二者细胞中线粒体的数量,得出结论.

分析 一、主动运输
1、特点:(1)逆浓度梯度运输;(2)需载体蛋白的协助;(3)需消耗细胞呼吸产生的能量.
2、影响因素:
(1)载体:细胞膜上的一类蛋白质
①不同物质的运输载体不同,不同生物膜上的载体的种类和数目不同.
②载体具有饱和性:当细胞膜上的载体已经达到饱和时,细胞吸收该载体的物质的速度不再随物质浓度增大而增大.
(2)能量:凡是影响细胞内产生能量的因素,都能影响主动运输,如氧气浓度、温度等. 
(3)温度:温度可影响有关酶的活性和生物膜的流动性,因而影响物质运输速率.低温会使物质跨膜运输速率下降.
二、健那绿可以将线粒体染成蓝绿色.

解答 解:(1)由步骤⑦的结果可知,甲组S-T值最大,说明甲组萝卜切片吸收KH2PO4的数量最多.
(2)由表中数据可知,乙组(丁组)加入HgCl2溶液的实验组较对照组细胞对KH2PO4的吸收量少.由题意可知,加入的HgCl2能阻断ATP水解,说明细胞吸收KH2PO4需要消耗能量(ATP),属于主动运输.
(3)①由表中数据可进一步推知,成熟组织吸收KH2PO4的能力大于幼嫩组织,根据主动运输的特点可推知,成熟组织细胞膜上的相应载体蛋白的数量或呼吸作用产生的ATP较幼嫩组织多.②健那绿可以将线粒体染成蓝绿色. 
故答案为:
(1)甲        
(2)甲、乙(或丙、丁)     乙组(丁组)加入HgCl2溶液阻断ATP水解过程后,细胞对KH2PO4的吸收量比甲组(丙组)显著减少,由此判断细胞吸收H2PO4需要消耗能量(ATP),属于主动运输     
(3)①转运H2PO4-的载体蛋白的数量    ②健那绿    蓝绿

点评 本题主要考查主动运输的条件,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力.

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(2)图1中④常用CaCl2溶液(或Ca2+)处理大肠杆菌,以利于基因表达载体进入大肠杆菌.构建的表达载体含有人胰岛素基因、终止子、标记基因及其启动子等,启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的位点,驱动基因转录出mRNA(最终获得所需要的蛋白质).
(3)采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造,使之起效时间缩短,保证餐后血糖高峰和血液中胰岛素高峰一致,研制速效胰岛素的思路是:确定蛋白质的功能→预期蛋白质的空间结构→推测应有的氨基酸序列→找到基因的碱基序列.下列关于蛋白质工程的说法不正确的是B
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B.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构
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(5)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点.
限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ
识别序列及
切割位点
GGATCC
CCTAGG
AAGCTT
TTCGAA
GAATTC
CTTAAG
CCCGGG
GGGCCC
图2是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答下列问题:
①用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaI酶切割,原因是SmaI酶会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因.
②构建含目的基因的重组质粒A时,选用BamhHI 和HindⅢ酶对含目的基因的外源DNA和质粒进行切割,可以防止其自身环化.
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