Question

【题目】[生物——选修1 生物技术实践]生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当水源不洁净或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准（GB5749—85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L。

（1）检验细菌的含量时，可以将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，进而计算出样本中的菌株数。这种微生物的计数方法获得的菌落数一般 （小于、大于或等于）活菌的实际数目。

（2）用该方法对微生物进行计数时是否需要设置对照组？ 。为什么？ 。

（3）分别取0．1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为 。

（4）为了更进一步的研究，需要纯化大肠杆菌。下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是 ，图B效果的接种方法是 。某同学在用A方法纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 。为了防止杂菌污染，有同学建议加入抗生素，你觉得可以吗？ 。

Answer 1

【答案】（15分，除注明外，每空2分）

（1）小于 （小于、大于或等于）。

（2） 需要 因为需要判断培养基是否被污染 。

（3） 1．61×108 。

（4） 稀释涂布平板法 ， 平板划线法 。

菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够） 。 不可以

【解析】（1）检验细菌的含量时，可以将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，进而计算出样本中的菌株数。这种微生物的计数方法获得的菌落数一般小于活菌的实际数目。

（2）用该方法对微生物进行计数时需要设置对照组，因为需要判断培养基是否被污染。

（3）分别取0．1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为1．61×108。

（4）获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，图B效果的接种方法是平板划线法。某同学在用A方法纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高。为了防止杂菌污染，但不能加入抗生素。