Question

9．(14分)噬菌体有极强的侵染能力，能在细菌中快速进行DNA复制，产生子代噬菌体，最终导致细菌破裂(称为溶菌状态)；或者整合到细菌基因组中潜伏起来，不产生子代噬菌体(称为溶原状态)。在转基因技术中常用噬菌体构建基因克隆载体，使其在受体细菌中大量扩增外源DNA，以备研究使用。相关操作如下图所示，请回答。

    (1)组装噬菌体时，可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36～51 kb，则经人工改造的gtl0载体可插入的外源DNA的最大长度为        kb。人工改造载体时，为获得较大的插入能力，可删除噬菌体DNA组成中的         序列以缩短其长度。

(2)噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因，因此人工改造时需加装适合的标记基因，如上图gtl0载体中的imm434基因。该基因编码一种阻止噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。构建基囚克隆载体需用到的酶是        ，外源DNA的插入位置应位于imm434基因           (之中／之外)，使经侵染培养后的受体菌处于          状态。

    (3)蛋白质与DNA相比，特有的化学元素是        ，若用放射性同位素标记该元素，再用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌，短时保温后搅拌、离心，可检测到放射性物质主要分布在试管            部分。

Answer 1

【答案】(1)7.6     控制溶原生长(或中部)     (2)限制酶和DNA连接酶    之中    溶菌    (3)S    上清液

【解析】考查基因工程的相关知识、蛋白质与DNA的比较等知识、同位素标记法。

(1)根据题意分析组装噬菌体时，可插入的外源DNA的最大长度为51-43.4=7.6kb。为获得较大的插入能力，人工改造载体时，可删除噬菌体DNA组成中的中部序列以缩短其长度。

(2)构建基因克隆载体需用到的酶是限制酶和DNA连接酶，外源DNA的插入位置应位于im434基因之中，使经侵染培养后的受体菌处于溶菌状态。

(3)蛋白质与DNA相比，特有的化学元素是S，若用放射性同位素标记该元素，再用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌，短时保温后搅拌、离心，可检测到放射性物质主要分布在试管上清液中。