Question

7．金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作．请回答下列问题：
（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐．培养基中加入7.5%NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长．
（2）上述培养基的灭菌方法是高压蒸气灭菌法．在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞．血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是检测血平板是否符合无菌要求．
（3）取10mL自来水样，加入90mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样．
（4）将0.1mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组（每组3个）血平板上的方法是稀释涂布平板法．在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）．若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37，则每升自来水中的活菌数约为3.8×10⁸．

Answer 1

分析 1、微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
2、培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：
①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）
②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
3、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）7.5%NaCl肉汤培养基中含有蛋白质，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化钠，所以提供的营养物质为碳源、氮源、水和无机盐；7.5%NaCl不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长，因此培养基中加入7.5%NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选．
（2）对培养基的灭菌采用的是高压蒸汽灭菌法．在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞．血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是检测血平板是否符合无菌要求．
（3）取10mL自来水样，加入90mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样．
（4）将0.1mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组（每组3个）血平板上的方法是稀释涂布平板法．根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）．若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37，则每升（1L=10³ml）自来水中的活菌数约为（39+38+37）÷3÷10^-3×10³×10=3.8×10⁸．
故答案为：
（1）碳源、氮源       不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长
（2）高压蒸气灭菌法    高温破坏血细胞     检测血平板是否符合无菌要求
（3）90
（4）稀释涂布平板法         透明圈（溶血圈）   3.8×10⁸

点评 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，对照实验的设计的重点是单一变量原则，在本题中单一变量的原则的设计是在培养基中是否加入鲜牛奶．