Question

【题目】消癌平是乌骨藤提取物水溶液，临床上治疗胃癌已获良好疗效。欲进一步研究其对癌症的作用效果，某研究人员进行了以下实验。

实验材料：人胃癌细胞SGC-7901细胞株，96孔板，细胞培养液，50mg/mL的消癌平、生理盐水，CO2培养箱，MTT作用液（一种检测细胞存活和生长的试剂）等

实验思路：

取对数生长的细胞，计数后配制成细胞悬液，随后加入96孔板，置于37℃CO2培养箱。将细胞悬液均分成6组，用生理盐水和药物（不同浓度的消癌平）作用7d，加MTT作用液，测OD值，计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。抑制率=（对照组OD540-加药组OD540）/对照组OD540×100%。回答下列问题：

（1）癌细胞增殖情况的判定可通过细胞计数，常采用血细胞计数法，若本实验用的对数生长期细胞数量要达到5×106个/mL，则采用25（中）×16（小）规格，每小格高度0．10mm，面积1/100mm2的计数板，计数总数需达____________个癌细胞；此外癌细胞标志分泌物的检查，也是临床常用方法。本实验中可取经培养后的癌细胞悬液，进行___________来检测。

（2）请设计实验结果记录表___________。

（3）分析与讨论：

①用流式细胞仪检测消癌平针剂对人胃癌（SGC-7901）细胞的作用机理如下图，则抑制作用在细胞周期___________时期，关于抑制作用方式，请你提出合理的假设____________________。

②若采用体内试验的方法研究消癌平对人胃癌细胞治疗作用，在将人胃癌（SGC-7901）细胞制备成的细胞凝块接种到小鼠体内时，应对小鼠作____________处理。

③为了更全面地了解消癌平对癌细胞的治疗效果，还可以从____________方面开展研究。（请答出2点）

Answer 1

【答案】400 离心后取细胞上清液 不同浓度消癌平对人胃癌SGC-7901细胞生长抑制作用的实验结果记录表

组别	OD540	抑制率%
空白对照（生理盐水）
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平

G1 消癌平抑制了DNA的复制，消癌平抑制了RNA的合成等 免疫抑制 如不同癌细胞种类；不同接种天数、细胞形态学观察等

【解析】

本实验的目的是研究消癌平对癌症的作用效果，故实验的自变量是不同浓度的消癌平，因变量是对癌细胞的抑制作用。

（1）该计数板每小格的体积是0.1×0.01=0.001 mm3，若本实验用的对数生长期细胞数量要达到5×106个/mL，则每小格即0.001 mm3的细胞数目为5×106÷106=5个，该计数板的规格为25（中）×16（小），故计数时需要计数5个中方格即5×16=80个小方格的细胞数目，即80×5=400个，故计数总数需达400个癌细胞；癌细胞的分泌物经离心后处于上清液中，故本实验中可取经培养后的癌细胞悬液，进行离心后取上清液来检测。

（2）本实验的自变量是不同浓度的消癌平，因变量是人胃癌SGC-7901细胞生长情况，故不同浓度消癌平对人胃癌SGC-7901细胞生长抑制作用的实验结果记录表如下：

组别	OD540	抑制率%
空白对照（生理盐水）
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平

（3）①由图可知，消癌平处理后，处于复制过程中及复制完成的细胞比例减少，说明抑制作用很可能发生在细胞周期的G1期，可能是消癌平抑制了DNA的复制。

②由于人的胃癌（SGC-7901）细胞对于小鼠相当于是抗原，会诱发小鼠的免疫反应，故需要对小鼠进行免疫抑制处理，以降低免疫排斥反应。

③本实验探究了不同浓度的消癌平对癌细胞的治疗效果，还可以研究消癌平对不同癌细胞的作用，或不同接种天数的治疗效果等。