Question

(13分)Ⅰ．如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题：

(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具有__________________。
(2)培育转基因羊的过程中，科研人员通过感染或____________技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是________细胞。③过程中还用到了__________________技术。
(3)受体细胞B应该是莴苣的________(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵)，导入该细胞后，需对该细胞进行培养，经________过程形成愈伤组织。
(4)莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是________________；过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M。
Ⅱ、下图四种质粒含有E₁和E₂两种限制酶的识别位点，Ap^r表示抗青霉素的抗性基因，Tc^r表示抗四环素的抗性基因。

(1)将两端用E₁切开的AP^r基因与用E₁切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有________（2分）。(可多选)

A．X-1	B．X-2
C．X-3	D．X-4

(2)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在四环素的培养基不能生长的大肠杆菌细胞类型有________、________、__________。

Answer 1

Ⅰ（1）标记基因  （2）显微注射  受精卵   动物细胞培养、胚胎移植
（3）体细胞  脱分化   （4）农杆菌转化法   钙离子
Ⅱ（1）A、C    （2）无质粒细胞    含X-1的细胞    含X-3的细胞

解析试题分析：Ⅰ、(1)质粒作为载体一般具有三个条件：有复制原点、有目的基因插入点、有标记基因。标记基因可以是抗生素抗性基因、荧光标记基因等，它有利于目的基因的检测。
(2)在动物基因工程中，可利用显微注射法将重组质粒导入到受精卵细胞中，因为受精卵比较大，易操作，并且受精卵的全能性高。受精卵可以用早期胚胎培养培养到桑椹胚或者囊胚，在通过胚胎移植技术导入到受孕母羊体内。
(3)植物基因工程中，一般利用体细胞作为受体细胞，然后利用植物组织培养技术首先进行脱分化形成愈伤组织，然后再进过再分化形成胚状体进而发育成完整植株。
(4)双子叶植物一般利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞。当受体细胞是细菌时，常用Ca²⁺处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。
Ⅱ、（1）用E1切开的质粒X－1后，该质粒不含AP^r基因，因此AP^r基因与用E1切开的质粒X－1混合后，可能有三种结果，AP^r基因自身环化、质粒X－1自身环化（X-3）、AP^r基因和质粒X－1重新组合（X-1），有自身环化连接形成的X-1、X-3，故选A、C。
（2）Tc^r表示抗四环素的抗性基因，因此质粒中含有Tc^r基因的导入大肠杆菌中，大肠杆菌不死亡，即图中X-2和X-4两种质粒，因此无质粒细胞、含X-1的细胞、含X-3的细胞均不能生长。
考点：本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力；从题目所给的图形中获取有效信息的能力。