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    下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．
    资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达，图中质粒上5′AOX1和3′AOXI（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子．
    资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作运载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．

    资料3：限制酶切位点
    限制酶 识别序列及酶切位点
    SnaBⅠ
    AcrⅡ
    SacⅠ
    BalⅡ
    （1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上
     
    、
     
    限制酶识别序列，这样设计的优点是
     
    ．
    （2）酶切获取基因后，需用
     
    将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌中，以获取
     
    ．
    （3）步骤3中应选用限制酶
     
    来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
    （4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用
     
    法进行检测．
    （5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入
     
    以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
    （6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是蛋白质合成后，细胞可以对其进行
     
    并分泌到细胞外，便于提取．
    考点：基因工程的应用
    专题：
    分析：根据重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子分析（1）．根据DNA连接酶的功能，基因过程的操作过程分析（2）．根据重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子分析（3）．根据用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因分析（4）．根据资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时诱导HBsAg基因表达分析（5）．根据原核细胞和真核细胞在细胞器种类上的区别，及细胞器的功能分析（6）．
    解答： 解：
    （1）重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子．而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间，只要在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种内切酶对质粒和目的基因同时切割，便会各自出现相同的粘性末端，便于重组与表达，同时防止自身环化，因此在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列． （2）①用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒；②导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度，短时间内可获取大量的重组质粒．
    （3）重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除BglⅡ外，其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因．
    （4）用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因．
    （5）资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时诱导HBsAg基因表达．
    （6）酵母菌为真核生物，细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物，不具有内质网和高尔基体等细胞器．
    故答案为：
    （1）SnaBⅠAvrⅡ避免质粒和目的基因自身环化（或任意连接）
    （2）DNA连接酶　大量重组质粒
    （3）BglⅡ
    （4）DNA分子杂交
    （5）甲醇
    （6）加工（修饰）
    点评：本题考查了基因工程应用的关知识，考查了学生对相关知识的理解和掌握情况，对图表的分析判断能力．培养学生搜集和处理科学信息的能力，思维能力，分析和解决问题的能力，具有一定的难度．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于甘油三酯代谢的叙述，错误的是（　　）
    A、外源性甘油三酯由乳糜微粒主要运送到脂肪组织
    B、脂肪组织中部分甘油三酯分解为脂肪酸和甘油转运入肝脏和其他组织细胞
    C、肝脏中脂肪酸和甘油重新合成甘油三酯由低密度脂蛋白转运至血液
    D、在寒冷饥饿时，脂肪组织中甘油三酯分解并转变为葡萄糖运送到各组织细胞供能

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图是抑制剂降低酶活性的两个作用机理模型，研究发现精氨酸能降低NAGase酶的催化效率，判断精氨酸降低NAGase酶活性机理的实验方案和结论是（　　）
    A、不断提高精氨酸浓度，如果反应速率不能提高，则属于模型A
    B、不断提高精氨酸浓度，如果反应速率不能提高，则属于模型B
    C、不断提高底物浓度，如果反应速率能提高，则属于模型A
    D、不断提高底物浓度，如果反应速率能提高，则属于模型B

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    根据有关微生物的知识，分析回答问题．

    （1）当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为
     
    ．
    （2）对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择性培养基进行微生物筛选．筛选硝化细菌的培养基成份包括
     
    （供选：葡萄糖、纤维素、牛肉膏、（NH4）2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料、H2O），制备培养基时，灭菌与调pH值的先后顺序是
     
    ．
    （3）如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成份是
     
    ，菌落特征为
     
    ．
    （4）将采自养殖池中的水样1ml稀释100倍，然后吸取稀释后的水样1ml，接种于上述硝化细菌选择性培养基上培养，接种所使用的工具是
     
    ．一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如右图．该养殖池每毫升水含有硝化细菌
     
    个．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    神经系统对内分泌功能的调节有甲、乙、丙三种方式，如图所示．据图分析回答：
    （1）甲、乙、丙中表示下丘脑对内分泌腺分级调节模式的是
     
    ．
    （2）若激素甲是甲状腺激素，促进其分泌的激素有
     
    ，它的分泌还有反馈调节，反馈调节的靶腺为
     
    ．激素能“定向”作用于相应的靶器官（组织），主要机制在于
     
    ．
    （3）抗利尿激素的合成和分泌是通过图中模式
     
    ，它由
     
    合成，作用的靶器官及其部位是
     
    ．
     
    可刺激该激素分泌量增加．它的调节意义在于
     
    ．
    （4）血糖升高，可以直接刺激胰岛B细胞，使胰岛素分泌增加；也可通过图中模式
     
    进行调节，使胰岛素分泌增加．如果胰岛素分泌不足，细胞摄取葡萄糖、氨基酸等
     
    （增加/减少）；甘油三酯等物质分解
     
    （增加/减少）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    图乙表示图甲所示池塘受污染后在人为干预下恢复过程的能量流动图（单位为103kJ/m2?y），请回答：
    （1）该池塘的不同水层分布着不同的生物，属于群落的结构，影响该结构的主要环境因素是
     
    ．
    （2）输入该生态系统的能量主要是
     
    ，第一营养级到第二营养级的能量传递效率为
     
    （保留一位小数）．
    （3）图乙中A表示，图中未利用的能量在生物体内的存在形式是
     
    ．
    （4）消费者需要补偿能量输入的主要原因是
     
    ．
    （5）该池塘被轻微污染后，通过自身的
     
    ，很快恢复到接近原来的状态．随着时间的推移，池塘内物种的数目即
     
    不断提高．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列有关细胞和细胞分裂的问题．
    图1甲是某种动物体细胞的亚显微结构示意图，乙是该动物产生的一个卵细胞示意图，丙、丁为植物的某个叶肉细胞中的两种膜结构以及发生的生化反应．请据图回答：
    （1）图1甲中结构①的主要功能是保护细胞和
     
    ．
    （2）甲图中具有膜结构的细胞器有
     
    （填序号）．将该细胞置于质量分数5%的葡萄糖溶液（与该细胞的细胞内液渗透压相等）中，一段时间细胞也会胀破，其原因可能是
     
    ．
    （3）若甲是人的大腿肌细胞，在进行长跑时，大腿肌肉会感到酸痛，这是由于葡萄糖在细胞的
     
    （填序号）中进行无氧呼吸产生乳酸的结果．
    （4）甲图与丙丁所在的细胞相比，结构上的区别表现在
     
    ．
    （5）影响丙、丁两种膜上生化反应的最主要环境因素分别是
     
    和
     

    （6）如果乙是甲细胞经过减数分裂形成的，则该生物的一个体细胞中最多时含有的染色体数是
     
    ；参与由甲形成乙过程的非膜结构的细胞器有[]
     
    和[]
     
    ．
    （7）根据乙图在图2方框中绘出形成该细胞的次级卵母细胞（中期）的示意图，并注明染色体上的基因（不考虑染色体互换）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    图表示二倍体生物细胞分裂过程中染色体、染色单体和DNA分子之间的关系，表示减数分裂第一次分裂后期的是（　　）
    A、
    B、
    C、
    D、

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列有关生物进化和生物多样性的问题．
    图中的小圆圈表示物种，箭头表示物种的变异，箭头线上有两条短线的代表被淘汰的变异个体．箭头线上无短线的代表未被淘汰的变异个体．
    （1）用达尔文自然选择学说对图1进行解释，具体可表述为
     
    ．达尔文的进化论正确地解释了生物
     
    现象的起源．
    资料显示，在果蝇中，每个基因的突变率约为10-5，现有一个个体数为108的种群．
    （2）若该种群的每一代出现基因突变数是2×107个，则每个果蝇的基因数
     
    对．果蝇的某一对相对性状由等位基因（N、n）控制，其中一个基因在纯合时能使合子致死（注：NN、XnXn、XNY等均视为纯合子）．有人用一对果蝇杂交，得F1代果蝇共185只，其中雄果蝇63只，F1代雌果蝇共有两种表现型，让F1代果蝇随机交配，理论上F2代成活个体构成的种群中基因N的频率为
     
    ．
    植物的抗逆性是指植物在不利的环境条件下出现的如抗寒、抗冻、抗盐、抗病虫等的抗逆性状．
    （3）在不利的环境条件下，许多植物表现出一些抗逆性，这说明突变的有害和有利并不是绝对的，它取决于
     
    ．植物的抗逆性基因来源于
     
    ．一种植物出现的优良抗逆性状，在自然状态下很难转移到其他种类的植物体内，主要是因为存在
     
    ．
    （4）请用现代生物进化理论分析基因工程育种不同于传统杂交育种技术的主要优点？
     
    ．

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