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    5．2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．如图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

    注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒．限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-．在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点．
    （1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来，理由是：可以连接，因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）．
    （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是显微注射技术．
    （3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因．获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免发生免疫排斥反应．
    （4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：②①③④（用数字表示）．
    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白．

    分析 分析图解，可以看出该荧光克隆兔涉及了多项生物工程技术．首先导入目的基因的甲兔的成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞与乙兔的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母兔子宫内，最后生成荧光克隆兔．

    解答 解：（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-，由此可知，由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的，因此在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端可以连接起来．
    （2）将重组质粒导入动物细胞的方法是显微注射法．
    （3）标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因．获得的转基因克隆猪，可以通过对抗原表达基因的改造从而解决避免免疫排斥反应的医学难题．
    （4）蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→相应基因的修饰改造或人工合成→相应的表达．
    故答案为：
    （1）可以连接，因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）
    （2）显微注射技术
    （3）为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因    发生免疫排斥反应
    （4）②①③④

    点评 本题难度适中，属于考纲中理解层次的要求，考查基因工程、蛋白质工程的相关知识，该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，要求考生具有一定的识图能力和理解能力．

    练习册系列答案
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    下列关于生态农业的叙述，不正确的是（ ）

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    13．细叶桉（喜光耐旱的高大乔木）和蛤蒌（常生长在树林中半阴处）均为湛江地区常见的植物．图甲为这两种植物在温度、水分均最适的条件下，光合作用速率与呼吸速率的比值（P/R）随光照强度变化的曲线图，据图回答．

    （1）图中表示细叶桉的是曲线A．
    （2）当光照强度为a时，B植物叶肉细胞内产生ATP的细胞器有线粒体、叶绿体．光照强度在c点之后，限制B植物P/R值增大的主要外界因素是CO2浓度．
    （3）某科研人员研究了细叶桉凋落叶对蛤蒌幼苗的影响，部分研究结果见图乙．研究结果表明：在凋落叶量为30（g/kg土壤）时，主要影响了蛤蒌幼苗光合作用中的光反应速率，依据是光合色素含量减少，C3生成速率无明显变化；在凋落叶含量为90（g/kg土壤）时，由于C3生成速率下降，说明蛤蒌幼苗对CO2（或“C5”）的利用下降．
    （4）图丙是研究人员测定的不同土壤含水量条件下蛤蒌叶片的气孔导度（气孔开放程度）和胞间CO2浓度的结果．随着土壤含水量降低，气孔导度降低，胞间CO2并未因光合作用消耗而降低，反而逐渐升高，对此有两种不同观点：观点一认为光合产物的输出变慢，导致细胞内光合产物积累，阻碍了CO2吸收利用；观点二认为水分亏缺导致叶绿体类囊体结构破坏，而且不能恢复．
    为验证上述观点，将培养在低土壤含水量条件下的蛤蒌幼苗分为两组，实验组蛤蒌幼苗进行正常供水处理，对照组保持原有状态．若实验组蛤蒌幼苗光合速率不能恢复，则观点二成立．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    20．已知果蝇眼色有鲜红色、红褐眼、白眼三种表现型，并且具有A基因的果蝇，眼色呈鲜红色；具有aa基因或A、a基因丢失（丢失一个或完全丢失）的果蝇颜色呈红褐色．另有B、b基因与果蝇眼色的形成有关．多只红褐眼果蝇和白眼果蝇杂交，F1均表现为白眼，F1白眼果蝇相互交配，F2的表现型及比例如下表．请回答问题：
    表现型白眼鲜红眼红褐眼
    个体数量72117859
    （1）A、a及B、b基因的本质区别是碱基对的排列顺序不同．
    （2）由果蝇杂交实验及F2的表现型及比例可以推测，果蝇的眼色遗传是由两对独立遗传的基因控制的．为了验证这一结论，可以让AaBb与aabb杂交，若出现白眼：鲜红眼：红褐眼=2：1：1结论，则说明猜测正确．
    （3）若符合（2）中的结论，则F2鲜红眼果蝇的基因型是AAbb和Aabb，F2鲜红眼果蝇相互交配，后代中褐红眼所占的比例是$\frac{1}{9}$，但由于某种原因，F2鲜红眼果蝇多次自交，后代中F2红褐眼果蝇所占的比例都高于这一分离比，经研究发现，一部分纯和鲜红眼果蝇的受精卵在发育过程中，A基因随机的整合到与果蝇眼色有关的染色体上，A基因在染色体上整合后出现如同图所示的三种情况（空白为基因整合的位点）为确定甲乙丙三种情况，设计杂交实验进行验证．
      实验步骤：
    ①将纯合鲜红眼分别与aabb基因型红褐眼果蝇杂交．
     ②观察统计后代的表现型及比
    结果预测：
    1．若鲜红眼：红褐眼=1：0，则为图甲所示的基因组成
    2．若鲜红眼：红褐眼=1：1，则为图乙所示的基因组成．
    3．若鲜红眼：红褐眼=3：1，则为图丙所示的基因组成．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    10．DNA模板链的一段碱基序列为TACAGACGA，正好决定一个三肽．与此对应的信使RNA的碱基顺序为（　　）
    A．AUGUCUGCUB．TACCGAAGAC．UACAGACGAD．ATGGCTTCT

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    13．下图1是马蛔虫（2N=4）的精子形成过程中的不同时期细胞分裂图象，图2是其精子形成过程中不同时期细胞中DNA、染色单体与染色体的数量关系．请分析回答：

    （1）图1中，细胞A含有2对同源染色体，从染色体的行为和数目分析，该细胞处于减数第一次分裂，该细胞的名称是初级精母细胞．
    （2）图1中，细胞B含有4条染色体，从染色体的行为和形态分析，该细胞处于减数第二次分裂，该细胞分裂产生的子细胞名称是精细胞．
    （3）图1中，细胞A所含的DNA、染色单体、染色体数量相当于图2所示的①时期．
    （4）图2中，②时期所示的DNA、染色单体、染色体的数量关系表明该时期的细胞处于减数第二次分裂．

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    12．豌豆子叶的黄色（Y）对绿色（y）为显性，圆粒种子（R）对皱粒种子（r）显性．两亲本豌豆杂交，对F1性状的统计结果如图所示，则下列说法不正确的是（　　）
    A．亲本的表现型分别是亲本为黄色圆粒、绿色圆粒
    B．F1中黄色圆粒豌豆的基因组成是YyRR
    C．F1中，纯合子占$\frac{1}{4}$
    D．F1表现型为黄圆：绿圆：黄皱：绿皱=3：3：1：1

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