【题目】某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点如下图所示，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。据图回答下列问题：
（1）该团队在将L1-GFP融合基因插入质粒P0时，使用了两种限制酶，据图推断它们是____。使用这两种酶进行酶切是为了保证 ____，也是为了保证____的正确连接。
（2）若观察到了____，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达的过程。
（3）为获得含有L1-GFP融合基因的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的____植入牛的____中，再进行体外培养、胚胎移植等相关操作。
（4）可采用胚胎分割移植技术一次获得多头表型相同的转基因牛，在对处于囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将____。
（5）为检测L1-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
【答案】E1和E4 L1-GFP融合基因的完整 L1-GFP融合基因与载体 绿色荧光 细胞核 去核卵母细胞 内细胞团均等分割 核DNA
【解析】
本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程、核移植等相关知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解核移植技术的过程、基因工程的基本操作程序，特别是明确PCR技术的原理和过程、基因表达载体的组成及其作用、限制酶的作用等相关知识并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题图中提取有效信息进行相关问题的解答。
(1)要保证目的基因在受体细胞中能够正确表达，目的基因的首端应有启动子，尾端应有终止子。已知L1-GFP融合基因是将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5ˊ末端而获得的，据此结合题意并分析图示可知：该团队在将L1-GFP融合基因插入质粒P0时，使用的两种限制酶是E1和E4。使用这两种酶进行酶切是为了保证L1-GFP融合基因的完整，也是为了保证L1-GFP融合基因与载体正确连接。
(2) 构建的真核表达载体P1中含有GFP基因，而GFP基因的表达产物“某种荧光蛋白（GFP）”在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光。若在导入P1的牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达。
(3) 若要获得含有L1-GFP融合基因的牛，可采用核移植技术，即将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中获得重组细胞，并将该重组细胞在体外培养成重组胚胎，再经过胚胎移植等。
(4) 采用胚胎分割技术对处于囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团进行均等分割。
(5) PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。若利用PCR方法检测L1-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，则应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。
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【题目】突触前抑制是指突触前轴突末梢(轴突2)兴奋而抑制另一个突触前膜的递质释放，从而使其突触后神经元(神经元3)呈现抑制性效应。据图回答有关问题：
（1）正确表示刺激轴突1后，神经元3轴突膜电位变化情况的是(如图丙)（______）
A．a→d B．b→c C．c→b D．d→a
（2）研究发现静息电位的产生主要是K＋外流形成的，若用蛋白酶处理细胞膜，K＋不再透过细胞膜，据此可推导静息电位产生时K＋跨膜运输的方式是________。
（3）图甲中有________个突触，在③中给予某药物后，再刺激轴突1，发现神经冲动的传递被阻断，但检测到③中神经递质的量和给予药物之前相同，这是由于该药物抑制了________(用图甲中标号表示)的功能。
（4）图乙是运动神经元3受到刺激产生兴奋时膜内电位变化图，A情况显示单独刺激轴突1时，测得神经元3膜内电位差值约是________ mV，与A情况相比，B种情况下，轴突1释放神经递质的量将________。
（5）①②④都属于细胞的________系统，但它们执行不同的功能，从其组成成分上分析，原因是_________________。
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【题目】图为神经元之间的突触结构。研究发现，当轴突a引起神经元e兴奋后，该兴奋在传导中可被轴突d抑制，在a兴奋之前，若b先兴奋，会导致e兴奋性降低。下列分析中正确的是
A. 图中含有2个突触
B. 当a使神经元e产生兴奋时，e膜内侧的电位变化为由正变负
C. d可能产生了一种抗体作用于e上的受体使其不能与神经递质结合，从而出现抑制效应
D. b兴奋时，其释放的神经递质会使a释放神经递质的量减少
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【题目】对不同地层中生物化石的研究表明，在古生代早期，海生的藻类植物繁盛，到了古生代中期，原始陆生植物出现，到古生代晚期，蕨类植物繁盛，裸子植物出现，中生代裸子植物繁盛，并在中生代晚期出现了被子植物，上述现象不能说明的生物进化事实是( )
A.生物进化方向是由水生到陆生
B.藻类植物是原始低等的植物类群
C.被子植物是高等的植物类群
D.蕨类植物和裸子植物都是由藻类植物直接进化而来的
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【题目】下图表示某种小鼠的进化过程，X、Y、Z表示新物种形成的基本环节。下列说法正确的是（ ）
A. 小鼠性状的改变，一定会很快引起该种群的进化
B. X表示基因突变及染色体变异，为进化提供原材料
C. Y使该种群基因频率发生定向改变，决定生物进化的方向
D. Z表示生殖隔离，但新物种的形成可以不通过Z环节
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【题目】2018年诺贝尔生理学或医学奖表彰了“抑制负免疫调节的癌症疗法”.T细胞是重要的免疫细胞,在抗肿瘤、抗感染中有重要作用.T细胞的活化或抑制需要双信号的刺激,第一信号来自T细胞对特异性抗原的识别;第二信号来自T细胞对协同刺激分子(起促进作用的正性共刺激或起抑制作用的负性共刺激)的识别.图1为T细胞表面的部分信号受体示意图,图2为某些组织细胞表达的协同刺激分子示意图.请据图分析回答问题:
(1)人和动物细胞的染色体上本来就存在着与癌有关的基因,导致正常细胞的生长和分裂失控变成癌细胞的根本原因是:_________________________________.我们体内每天都可以产生癌细胞,免疫系统通过它的_______功能降低着癌症的发病率.
(2)图1所示,T细胞活化的第一信号是特异性抗原与T细胞表面______受体结合.
(3)图2的组织细胞表达B7能与T细胞的表面CD28受体结合,可协助T细胞完全活化进而引起T细胞的_______,已活化的T细胞逐渐高表达CTLAＧ4,通过与B7结合可抑制T细胞的活化,使免疫应答维持相对平衡状态.若要增强免疫系统对肿瘤细胞的攻击,从信号分子与受体结合的角度可采取的方法有:_____________________________________
(4)有部分肿瘤细胞可以逃逸T细胞免疫,研究发现与其高表达的膜蛋白PDＧL有关,肿瘤细胞被TCR受体识别的同时,PDＧL被PDＧ1识别并结合,激活T细胞的_______(填“正性共刺激”或“负性共刺激”)信号,从而实现细胞逃逸.为避免肿瘤细胞免疫逃逸,利用单克隆抗体技术生产出与_______特异性结合的药物是目前肿瘤治疗的新靶点、新思路.
(5)因T细胞大量活化而导致免疫反应剧烈,与绝大多数肿瘤疗法一样,免疫疗法也会有一些副反应,患者需服用一定量的_______来控制这些副作用.
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