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萌发的小麦种子中有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶较耐热,但在pH为3.6下可迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.
实验材料和用具:萌发的小麦种子、麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、水浴锅等.
实验步骤:
一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的试管,编号,按表加入试剂后60℃水浴加热2min.
试剂试管号
1234567
麦芽糖标准液(mL)00.20.61.01.41.62.0
蒸馏水(mL)2.01.81.41.0XYZ
斐林试剂(mL)2.02.02.02.02.02.02.0
二:用萌发的小麦种子制备淀粉酶溶液.
三:将装有淀粉酶溶液的试管70℃水浴15min后迅速冷却.
四:另取4支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液,向C、D试管中各加2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将4支试管40℃水浴10min.将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续40℃水浴10min.
五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入
 
 
,观察颜色变化.
结果分析:将E试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率.请分析回答:
(1)本实验的目的是测定小麦种子中
 

(2)步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X\Y\Z)分别是
 
 
 
(单位mL).
(3)实验中B试管所起的具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中
 

(4)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在第
 
步骤进行改变.
考点:探究影响酶活性的因素,检测还原糖的实验
专题:
分析:分析表格:实验设计要遵循单一变量原则,1~4号中溶液总量为4ml,为了保证各试管中试剂量相等,表中X应为0.6ml、Y应为0.4ml、Z应为0ml.实验的步骤三中,将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,这样β-淀粉酶已经失活,但α-淀粉酶较耐热,仍具有生物活性,所以本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率.
解答: 解:根据图表可知,向E、F试管分别加入的是2 mL斐林试剂,并在60℃水浴条件下加热2 min.
(1)β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活,而本实验的步骤三中,将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,这样β-淀粉酶已经失活,但α-淀粉酶较耐热,仍具有生物活性,所以本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率.
(2)实验设计要遵循对照原则和单一变量原则,所以各个试管中液体的总量要相等,则步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是0.6mL、0.4mL、0mL.
(3)实验中B试管起对照作用,具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖.
(4)萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.因此要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤三进行改变,即排除α-淀粉酶的干扰.
故答案为:
 2 mL斐林试剂,60℃水浴加热2 min后
(1)α淀粉酶催化效率  
(2)0.6    0.4    0
(3)是否存在还原糖
(4)三
点评:本题结合图表,考查影响酶活性的探究实验,要求考生掌握实验设计需要遵循的原则,即对照原则和单一变量原则,能结合题干信息“α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活”和实验步骤三的具体操作,判断该实验的目的,同时能根据实验的单一变量原则,判断表中X、Y、Z的具体数值.
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