Question

【题目】拟南芥中有抗冻基因CBF；苜蓿是温带地区重要的牧草，低温是制约其生长的限制因子之一。如图是培育转基因抗冻苜蓿植株的过程示意图，据图回答下列问题：

（1）图中的①先要用某种限制性核酸内切酶断开DNA片段中的______个磷酸二酯键得到目的基因，再通过______技术获得大量的目的基因。这些目的基因必须要与质粒等载体重组后再导入宿主细胞，其主要原因是目的基因经重组后在宿主细胞内能实现______。

（A．转录 B．复制 C．翻译 D．整合到宿主DNA中）

（2）图中的②过程的农杆菌经转化成功后再去感染苜蓿组织块，这种转基因方法的主要优点有______、______（至少写出二点）。

（3）图中的③过程若是通过胚胎发生途径实现，须将愈伤组织经______培养得到大量的单细胞，再转移到含有适当配比的______的培养基中继续分化成胚状体，最后形成相应的植株。

Answer 1

【答案】4 PCR B 易于导入重组质粒 易于将目的基因整合到植物的染色体DNA上 液体悬浮 营养物质和生长调节剂

【解析】

根据图示分析培育转基因抗冻苜蓿植株的过程为：从拟南芥获取目的基因（抗冻基因CBF），与质粒连接形成重组质粒，利用农杆菌转化法将其导入到苜蓿组织块中，诱导其脱分化为愈伤组织，再分化发育为抗冻苜蓿植株。

（1）获得目的基因时需要用限制酶切割DNA，两个切口位于目的基因两侧，共需要断开4个磷酸二酯键。利用PCR技术大量扩增目的基因。重组质粒能在宿主细胞中能够自我复制。

（2）②过程为利用农杆菌转化法将重组质粒导入植物细胞，这种转基因方法的主要优点有易于导入重组质粒、易于将目的基因整合到植物的染色体DNA上。

（3）图中的③过程若是通过胚胎发生途径实现，须将愈伤组织经液体悬浮培养得到大量的单细胞，再转移到含有适当配比的营养物质和生长调节剂的培养基中继续分化成胚状体，最后形成相应的植株。