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    20．动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，回答下列问题：
    （1）动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，使用合成培养基培养动物细胞时，通常需要加入血清/血浆等天然成分，细胞培养所需气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是维持（培养液的）pH，细胞体外培养的适宜温度一般与动物体温相近；
    （2）动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层），要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶进行处理；
    （3）诱导动物细胞融合常用的化学试剂是聚乙二醇（PEG），单克隆抗体最主要的优点是特异性强，灵敏度高，并可大量制备．

    分析 1、培养条件：
    （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物
    （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
    （3）温度和PH：
    （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH．）
    2、当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制．此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理．
    3、诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动、电激）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）．

    解答 解：（1）动物细胞培养液为合成培养基，但该培养基中往往要加入一些血清等天然成分．动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH．动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近．
    （2）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）．要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）．
    （3）诱导动物细胞融合常用的化学试剂是聚乙二醇（PEG）．单克隆抗体的最主要优点是特异性强，灵敏度高，并可能大量制备．
    故答案为：
    （1）血清/血浆（写一个就给分）  维持（培养液的）pH     动物体温
    （2）接触抑制      单层（或一层）      胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
    （3）聚乙二醇（PEG）   特异性强，灵敏度高

    点评 本题考查动物细胞培养、单克隆抗体的制备的相关知识，做该题要求考生熟记动物细胞培养的过程及条件、单克隆抗体制备的原理、过程的具体内容，难度不大．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．如图为植物细胞融合及组织培养过程示意图．下列说法不正确的是（　　）
    A．植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍
    B．杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性
    C．植物原生质体A和B融合可用PEG做诱导剂
    D．若A的基因型为Rr，B的基因型为Yy，诱导融合的原生质体基因型一定是YyRr

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    14．在基因工程技术中，需要用Ca2+处理的环节是（　　）
    A．目的基因的提取和导入B．目的基因与载体结合
    C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的检测与鉴定

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．某基因型为的完全连锁的个体自交，子一代仅三种表现型，其中A（a）、B（b）基因控制不同性状，则A（a）、B（b）基因的显隐性关系不可能是（　　）
    A．A对a完全显性，B对b不完全显性B．A对a不完全显性，B对b完全显性
    C．A对a不完全显性，B对b不完全显性D．A对a完全显性，B对b完全显性

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．如图为A、B两种二倍体植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：

    （1）步骤①的方法是酶解法．步骤②常用的化学试剂是聚乙二醇，之后是（是/否）需要筛选．
    （2）在利用杂种细胞培育成为杂种植物的过程中，运用的技术手段是植物组织培养技术，其中步骤④是脱分化．植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植物，与A、B两种植物相比，该杂种植物是新物种的原因是该杂种植株与A、B两种植物间均存在生殖隔离．
    （3）培育该杂种植物的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔遗传规律？不遵循为什么？该过程不属于有性生殖．

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    5．回答下列有关生物技术与基因表达的问题
    如图1所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图．
    选用的质粒A上有 I、II、III、IV四种限制酶切割位点．

    （1）据图推断过程①获取目的基因时，应选用的限制酶是II和 III．过程②是利用DNA连接酶酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒．过程③为重组质粒导入受体细胞，如受体细胞为小鼠受精卵，则选用的常规方法是显微注射．
    （2）如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A，产生1.8kb和8.2kb的两种片段（1kb=1000对碱基对），如用四种酶同时切割质粒A，则产生0.6kb和8.2kb两种片段，那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A，则产生的片段有1.2kb和8.8kb．
    （3）获得此蛋白酶后，利用酶的固定化技术能回收和重复利用此蛋白酶，如图2所示属于固定化技术中的载体结合法的是B．

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    12．在青藏高原高寒草甸生态系统中，髙原雪兔是一种常见动物，常栖息在低矮草地中，天敌有香鼬、艾虎、赤狐、狼等．冬季时，高原雪兔几乎成为这些动物唯一的食物来源．为了观察预警，高原雪兔会把巢穴周围民势较高的草从基部咬断．高原雪兔废弃的洞穴还能为褐背拟地鸦和多种雪雀提供繁殖场所．请回答下列相关问题：
    （1）研究人员通常采用标志重捕法估算该地区高原雪兔的种群数量，然后根据调查统计的数据，绘制了高原雪兔种群数量Nt+1/Nt，比值与时间（t）的变化曲线，当t为a～b时，种群的年龄组成为衰退型；当t为c～e时，髙原雪兔的出生率大于（填“大于”“等于”或“小于”）死亡率．
    （2）高原雪兔的存在增加（填“增加”“减少”或“不影响”）高寒草甸生态系统的物种丰富度；其挖洞穴居的习性，增加了本地原生植物产量，改善了土壤条件，这体现了生物多样性的间接价值．高原雪兔感受到赤狐粪、尿的气味，会有躲到洞穴中的行为，这体现了信息传递具有调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定的作用．
    （3）髙寒草甸生态系统祗抗力稳定性低，原因是该生态系统的生物种类少，营养结构（食物网）简单，自我调节能力弱．

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    9．分析有关遗传病的资料，回答问题．
    由苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的苯丙氨酸代谢障碍，是一种严重的单基因遗传病，称为苯丙酮尿症（PKU），正常人群中每70人有1人是该致病基因的携带者（显、隐性基因分别用A、a表示）．图1是某患者的家族系谱图，其中Ⅱ-1、Ⅱ-2、Ⅱ-3及胎儿Ⅲ-1（羊水细胞）的DNA经限制酶Msp酶切，产生不同的片段（kb表示千碱基对），经电泳后结果见图2．
    请回答下列问题：

    （1）Ⅰ-1、Ⅱ-1的基因型分别为Aa、aa．
    （2）依据电泳结果，胎儿Ⅲ-1的基因型是Aa．Ⅲ-1长大后，若与正常异性婚配，生一个正常孩子的概率为$\frac{279}{280}$．
    （3）为了调查PKU发病率及其遗传方式，调查方法可分别选择为AB（多选题）．
    A．在人群中随机抽样调查   B．在患者家系中调查
    C．在女性中随机抽样调查    D．对同卵和异卵双胞胎进行分析对比
    （4）已知人类红绿色盲症是X染色体隐性遗传病（致病基因用b表示），Ⅱ-2和Ⅱ-3色觉正常，Ⅲ-1是红绿色盲患者，则Ⅲ-1两对基因的基因型是AaXbY．

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    10．下列关于动物细胞培养的过程叙述，错误的是（　　）
    A．制作细胞悬液时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
    B．悬液中分散的细胞很快贴附在细胞壁上，细胞贴壁体现了细胞的适应性
    C．细胞进行有丝分裂，数量增加到接触时可以使用胃蛋白酶处理后分瓶培养
    D．10代以内的细胞保持细胞正常的二倍体核型

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