Question

15．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．试验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用划线法或稀释涂布（或涂布）法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比A弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素A．

Answer 1

分析 （1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（2）根据材料分析，透明圈的出现，说明该菌不能生长．

解答 解：（1）从样本中分离菌落常用稀释涂布平板法或平板划线法．将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
（2）将液体的菌液接种在固体培养基上需要使用稀释涂布平板法进行接种．
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该病菌对C的敏感性比对A的弱．含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
故答案为：
（1）划线    稀释涂布（或涂布）
（2）涂布
（3）敏感   不敏感   该致病菌对C的敏感性比A弱   耐药菌
（4）A

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的接种方法，以及分析实验结果获取结论的能力和，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力，解决问题的关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题．