Question

9．下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：
（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的脱氧核苷酸序列，再通过化学方法合成所需基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、模板（目的基因或A基因）、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．
（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为基因表达载体．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子．

Answer 1

分析 分析题图：图示是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图，其中A为目的基因，B为运载体（质粒），C为重组质粒，D为受体细胞．

解答 解：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的脱氧核苷酸序列，再通过人工合成（化学）方法合成所需基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时所需的条件：引物、模板DNA、原料（4种脱氧核糖核苷酸）和耐热性的DNA聚合酶等．
（3）由A和载体B拼接形成的C称为基因表达载体．
（4）将目的基因导入微生物细胞时，常用Ca²⁺处理，使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子，这样可以提高受体细胞的转化率．
故答案为：
（1）逆转录酶   DNA聚合酶    氨基酸    脱氧核苷酸
（2）引物   模板（目的基因或A基因）
（3）基因表达载体 
（4）使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子

点评 本题结合制备“工程菌”的示意图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．