Question

9．下列说法正确的是（　　）

• A． 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌
• B． 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
• C． 平板划线时除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端
• D． 加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据是培养基配方的比例．
（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖．
（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL．
（4）调pH；
（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌．
（6）倒平板．
2、培养基配制时的注意事项：
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．

解答 解：A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，A错误；
B、消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害，B正确；
C、平板划线时除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的末端，而不是第一次，C错误；
D、指示剂和染料混有微生物，故加入培养基前需灭菌，D错误．
故选：B．

点评 本题考查微生物的培养和分离，重点考查培养基的制备过程和无菌技术，要求考生识记培养基制备的具体步骤，掌握各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．