Question

6．干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究．如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示．

（1）在利用PCR技术扩增R或r基因的过程中，利用引物可寻找抗旱基因的位置并进行扩增．
（2）若被检植株发生A现象，不发生B、C现象，则被检植物的基因型为RR．
（3）用从基因文库中获取目的基因的方法获取抗旱基因时需要用到限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（4）经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子．
（5）要快速繁殖转基因抗旱烟草植株，目前常用的技术是植物组织培养，该技术的基本过程是：将离体的烟草细胞诱导脱分化形成愈伤组织，然后再分化出根和芽并发育成小植株．该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和单倍体育种．

Answer 1

分析 1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程．细胞分化的实质：基因的选择性表达．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

解答 解：（1）用PCR技术扩增R或r基因时，需要用引物寻找抗旱基因的位置．
（2）被检植物发生A现象，不发生B、C现象，即r探针没有形成杂交环，所以被检植物的基因型为RR．
（3）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（4）经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子．
（5）植物组织培养技术可快速繁殖抗旱烟草植株，该技术包括脱分化和再分化两个基本过程，其中即将离体的烟草细胞诱导脱分化形成愈伤组织，然后再分化出根和芽并发育成小植株．该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和单倍体育种．
故答案为：
（1）引物
（2）RR 
（3）磷酸二酯键
（4）基因表达载体上目的基因首端未加入启动子
（5）植物组织培养        愈伤组织      单倍体育种

点评 本题考查细胞分化、基因工程等知识，要求考生识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质；识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．