Question

15．如表是某同学列出的分离并计数土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
琼脂	15.0g

（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行灭菌和倒平板．
（2）从功能上看，该培养基属于选择培养基，细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时，（需要/不需要）需要设置对照组（即不接种进行培养），原因是判断培养基是否被杂菌污染
（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为10⁶的土壤样液0.1mL，培养一段时间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为2.4×10⁹，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落．

Answer 1

分析 1、培养微生物时，培养基中需要加入碳源、氮源、无机盐、水，还需要满足微生物生长对PH，特殊营养物质以及氧气的要求．如培养乳酸菌需要加入维生素，培养霉菌需要把PH值调到酸性等．
2、能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，进一步利用，只含有尿素作为N源的培养基对微生物具有选择作用．

解答 解：（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行灭菌和倒平板．
（2）分析表格可知，培养基中以尿素作为唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以该培养基从用途上属于选择培养基．细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时，为了判断培养基是否被杂菌污染，因此实验需要设置对照组（即不接种进行培养）．
（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为10⁶的土壤样液0.1mL，培养一段时间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量=（180+220+320）÷3×10⁶÷0.1=2.4×10⁹，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落．
故答案为：
（1）灭菌倒平板
（2）选择脲酶（催化尿素分解的酶）
（3）需要判断培养基是否被杂菌污染
（4）2.4×10⁹当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落

点评 本题考查微生物的培养、分解尿素的细菌的分离和计数等相关知识，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力．