Question

【题目】下面是科学家利用现代生物技术研制用于癌症治疗的鼠一人嵌合抗体的流程图。请回答:

（1）利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期________，设计________，进一步推测应有的氨基酸序列，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠－人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其表达。在lg基因表达载体构建的过程中，人和鼠的基因要用同一种限制酶切割核苷酸之间的________。

（2）图中嵌合载体启动子位于基因的首端,它是________识别和结合的部位；终止子是________的终点；嵌合载体中还应含有________，以便重组DNA的鉴定和筛选。

（3）图中的“抗体分泌细胞”名称是________，检测目的基因在淋巴细胞中是否得到表达可用________技术。

（4）在制备单克隆嵌合抗体过程中要进行两次筛选，第一次筛选的目的是________；第二次筛选的目的是________。

Answer 1

【答案】嵌合抗体的功能 嵌合抗体的结构 磷酸二酯键 RNA聚合酶 转录 标记基因 浆细胞（效应B细胞） 抗原－抗体杂交 获得杂交瘤细胞 获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞

【解析】

蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA），所以利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期鼠－人嵌合抗体的功能设计预期嵌合抗体的结构，进一步推测应有的氨基酸序列，最终通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠－人嵌合抗体基因，然后导入鼠淋巴细胞中使其表达。基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。制备单克隆抗体需要进行2次筛选，第一次筛选是在两细胞融合后，目的是选出符合要求的杂交瘤细胞，而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后，筛选得目的是为了选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

（1）利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时，首先必须根据预期嵌合抗体的功能，设计嵌合抗体的结构；在Ig基因表达载体构建的过程中，人和鼠的基因要用同种限制性核酸内切酶切割核苷酸之间的磷酸二酯键。

（2）图中位于基因首端的嵌合载体启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位；终止子是转录的终点；此外嵌合载体中还应含有标记基因，以便重组DNA的鉴定和筛选。

（3）分泌抗体的是浆细胞，检测目的基因在淋巴细胞中是否得到表达可用抗原-抗体杂交技术。

（4）在制备单克隆嵌合抗体过程中要进行筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞；第二次筛选的目的是获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。