Question

【题目】生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定知识基础和能力基础．请回答下列有关生物技术实践中的问题：
（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染．常用的灭菌方法有灭菌、干热灭菌和灭菌．
（2）在果醋、泡菜的制作过程中，需要氧气的是；在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是 ．
（3）果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作过程中主要利用的微生物分别为酵母菌、、、 ， 属于原核生物的是 ， 只进行无氧呼吸的是 ．
（4）在制备固定化酵母细胞实验中，海藻酸钠的浓度对实验结果影响较大，若浓度过高，则 ， 通常评价该实验结果主要是观察凝胶珠的 ．
（5）DNA粗提取与鉴定
①利用DNA在不同浓度的溶液中溶解度的不同，通过控制其溶液的浓度去除杂质．
②DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、溶液可使DNA析出．
③DNA的鉴定：将析出的DNA溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中，加入 ， 沸水浴加热，溶液变蓝．
（6）血红蛋白的提取和分离的实验中，在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是 ．
（7）提取植物芳香油时可采用的方法有、和 ．
（8）玫瑰油被称为“液体黄金”，是世界香料工业中不可取代的原料，多用于制造高级香水等化妆品．如图表示提取玫瑰油的流程，其中A表示；B表示 ， 其中加入NaCl的作用是 ．

（9）植物芳香油溶解性的特点是难溶于 ， 易溶于 ， 因此可用后者作为提取剂来提取植物芳香油．
（10）若利用组织培养技术对玫瑰进行无性繁殖，玫瑰的组织培养需在培养基上进行，选取 ， 冲洗干净后，用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的中摇动2～3次，外植体再经过和过程培育成植株幼苗，该过程的关键激素是、 ．
（11）杀虫基因通过①﹣④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做；其中（填标号）是转基因抗虫水稻的核心步骤，需要的工具酶是、 ．
（12）“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有、 ．
（13）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有 ， 它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）中上．
（14）图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（部分基因及部分限制酶作用位点），组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．据图分析：
①人工改造质粒时，要使抗虫基因表达，还应插入 ， 其作用是 ．
②人工改造质粒时，先用限制酶Ⅰ处理，可以去除质粒上的基因和基因（填上图质粒上的基因名称），保证重组质粒进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；然后再用限制酶Ⅱ分别切割经过改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，那么成功导入抗虫基因的水稻胚细胞将不能在含（填抗生素名称）的培养基上生长．
（15）动物细胞培养时，需要利用酶处理组织块，使其分散成单个细胞；培养过程中细胞表现出和等特点；通常还要在细胞培养液中添加一定量的 ， 以防培养过程中的污染，另外通常需加入等一些天然成分．
（16）杂交瘤细胞的特点是 ， 单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有并可能大量制备的特点．
（17）植物体细胞杂交之前，需要用去除细胞壁，获得具有活力的 ， 一般用作为诱导剂来诱导其融合．
（18）试管牛的生产过程中，在试管中完成的步骤为和 ， 将胚胎培养发育至阶段再移植到代孕母体体内．
（19）对污染的矿山进行生态修复，一般选用耐重金属污染的本地植物进行种植，体现了生态工程的原理．

Answer 1

【答案】
（1）灼烧；高压蒸汽（答案顺序可颠倒）
（2）果醋；用果胶酶处理
（3）醋酸菌；毛霉；乳酸菌；醋酸菌和乳酸菌；乳酸菌
（4）不易形成凝胶珠；颜色和形状
（5）NaCl；（体积分数为95%的）酒精溶液；二苯胺
（6）准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致
（7）萃取法；蒸馏法；压榨法
（8）水蒸气蒸馏；无水硫酸钠；增加盐的浓度，使油和水出现明显的分层
（9）水；有机溶剂
（10）MS；生长旺盛的嫩枝；酒精；脱分化；再分化；细胞分裂素；生长素
（11）转化；①；限制性核酸内切酶（限制酶）；DNA连接酶
（12）基因工程技术（转基因技术）；植物组织培养技术
（13）T﹣DNA；染色体的DNA
（14）启动子；RNA聚合酶提供识别和结合的部位，驱动转录；tms；tmr；四环素
（15）胰蛋白酶或胶原蛋白酶；细胞贴壁；接触抑制；抗生素；血清、血浆
（16）既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体；特异性强、灵敏度高
（17）纤维素酶和果胶酶；原生质体；聚乙二醇（PEG）
（18）体外受精；胚胎的早期培养；桑椹胚或囊胚
（19）协调与平衡
【解析】解：（1）动物细胞培养时，需要利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，使其分散成单个细胞；培养过程中细胞表现出细胞贴壁和接触抑制等特点；通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染，另外通常需加入血清、血浆等一些天然成分．（2）杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高并可能大量制备的特点．（3）植物体细胞杂交之前，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，一般用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂来诱导其融合．（4）试管牛的生产过程中，在试管中完成的步骤为体外受精 和胚胎的早期培养，将胚胎培养发育至桑椹胚或囊胚阶段再移植到代孕母体体内．（5）对污染的矿山进行生态修复，一般选用耐重金属污染的本地植物进行种植，体现了生态工程的 协调与平衡原理．
【考点精析】认真审题，首先需要了解动物细胞与组织培养过程(取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养)，还要掌握单克隆抗体的制备(对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞；然后对它进行克隆化培养和抗体检测；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体)的相关知识才是答题的关键．