Question

5．科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖的调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答以下相关问题．
（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞．第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞．
（2）如果是利用基因工程导入基因（prG）的方法来制备单克隆抗体，其过程如图所示．请回答：

①形成重组质粒所需要酶的具体名称是DNA限制性内切酶、DNA连接酶；
②将重组质粒导入的受体细胞（Ⅱ）是效应B淋巴细胞．
（3）如果是利用细胞核移植技术的方法来构建重组细胞生产单克隆抗体，其过程如图所示．请回答：

①图中的细胞B应是无限增值的细胞．
②由细胞A为重组细胞提供细胞核的原因是其能够激活基因并控制合成相应抗体；
（4）上述三种技术的基础是动物细胞培养技术，而且都有筛选，其目的是筛选出既能无限增殖又能产生特定抗体细胞．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
2、传统的单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
3、基因工程的方法：由于效应B细胞没有细胞增殖的能力，因此选择“无限增殖调控基因（prG）”作为目的基因，“效应B细胞”作为受体细胞，以期望获得既能无限增殖、又能产生特异性抗体的效应B细胞．
4、细胞核移植技术生产单克隆抗体：由于某些能无限增殖的细胞的细胞质中含有无限增殖调控基因（prG），因此在细胞核移植时，选择效应B细胞的细胞核和骨髓瘤细胞的细胞质进行细胞核移植．

解答 解：（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞．第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞．
（2）①在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒；
②将重组质粒导入的受体细胞（Ⅱ）是能产生特定抗体的效应B淋巴细胞．
（3）如果是利用细胞核移植技术的方法来构建重组细胞生产单克隆抗体．
①图中的细胞B应是无限增值的细胞．其细胞质中含有无限增殖的调控基因（prG）．
②由细胞A为重组细胞提供细胞核的原因是其能够激活有无限增殖的调控基因并控制合成相应抗体．
（4）上述三种技术的基础是动物细胞培养技术，而且都有筛选，其目的是筛选出既能无限增殖又能产生特定抗体的细胞．
故答案为：
（1）能产生所需抗体的杂交瘤细胞
（2）①DNA限制性内切酶、DNA连接酶
②效应B细胞
（3）①无限增值   ②相应抗体
（4）既能无限增殖又能产生特定抗体

点评 本题考查基因工程、动物细胞核移植和单克隆抗体的制备过程，比较综合，但不是特别难；答题时要注意题干中的信息，如利用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能将浆细胞的细胞核移植到去核的含有prG基因的细胞质中，因为根据题干可知，prG基因只存在于能无限增殖细胞的细胞质中．