Question

1．根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
（1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是果汁的澄清度、果汁的体积．用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存．
（2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红，培养后如果PH升高，指示剂将变红，因为细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强．
（3）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．
①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子丙和丁也保留在袋内．
②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子丙移动速度最快．
③若将样品以2 000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲可能不存在于沉淀中．
（4）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为对照．

Answer 1

分析 1、为提高酶的产量，降低酶生产的成本，可通过基因工程（基因突变）等技术手段对产酶微生物进行改造；降低生产成本可利用固定化酶等技术使酶能够重复利用．
2、透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以让小分子可以自由进出，而大分子不能通过．
3、凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快．

解答 解：（1）在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过设置梯度来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是果汁的澄清度、果汁的体积．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存，此方法叫做甘油管藏．
（2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红．培养后如果PH升高，指示剂将变红，因为细菌合成的尿酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强．
（3）据图2可知，分子量大小为丙＞丁＞乙＞戊＞甲．
①血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析，即将集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，去掉分子量较小的杂质，原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中，血红蛋白分子量较大，不能通过透析袋进入缓冲溶液．将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子丙和丁也保留在袋内，因其分子量大于乙．
②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，分子量大的分子经过的路程短，故分子量大的蛋白质分子先洗脱出来，则分子丙移动速度最快．
③若将样品以2000r/min的速度离心10min，分子量大的分子进入沉淀中，故若分子戊存在于沉淀中，则分子乙、丙、丁均存在于沉淀中，分子较小的甲可能不存在于沉淀中．
（4）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为对照．
故答案为：
（1）设置梯度     果汁的澄清度、果汁的体积-20
（2）酚红    脲酶
（3）①丙和丁    ②丙     ③甲
（4）萃取剂的性质和用量     纸层析     胡萝卜素标准样品（标准样品也给分）

点评 本题考查果胶酶的活性测定、果酒果醋的制作、蛋白质的提取和分离，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中．