Question

如图所示为平板划线法分离纯化细菌示意图．根据所学知识，完成下列问题．

（1）微生物所需的营养成分包括

 

、

 

、水和无机盐．
（2）培养微生物时，除了考虑微生物生长所需营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、

 

以及是否需要O₂等．
（3）对培养基进行灭菌时，多采取

 

法，而对接种环或涂布器灭菌时则用

 

法．
（4）平板划线时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要

 

，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线

 

．
（5）脲酶可以将尿素分解为NH₃，从而使尿素溶液PH升高，这可用

 

试剂来检测．用纤维素作唯一氮源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能还混杂有

 

生物．
（6）抗生素可以抑制肽聚糖合成，从而可以抑制多数原核生物繁殖．实验室现有酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌三种微生物混杂生长的固体培养基，已知大肠杆菌菌落遇伊红美蓝试剂变为紫色，并带有金属光泽；金黄色葡萄球菌耐高浓度食盐水，菌落为金黄色；酵母菌细胞壁成分主要为几丁质，营养条件好，氧气充足时，显微镜下可见典型的出芽生殖．现在请你设计一个合理的实验方案，从一个培养基中，将三种微生物依次分离开来．（所需试剂可自选）
实验方案：

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子．
2、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤．
3、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
4、微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．

解答： 解：（1）培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子．
（2）培养微生物时，除了考虑微生物生长所需营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、pH以及是否需要O₂等．
（3）对培养基进行灭菌时，多采取高压蒸汽灭菌法，而对接种环或涂布器灭菌时则用灼烧灭菌．
（4）平板划线时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要对接种环灼烧灭菌，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线相交．
（5）脲酶可以将尿素分解为NH₃，从而使尿素溶液PH升高，这可用酚酞试剂来检测．用纤维素作唯一氮源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能还混杂有自养微生物．
（6）要从一个培养基中，将三种微生物依次分离开来，就必须根据各自不同的特点来区分，比如根据菌落颜色，首先分离出金黄色葡萄球菌，然后向培养基中加入伊红美蓝，将变为紫色，带有金属光泽的菌落分离出来，得到大肠杆菌，然后加入非磺胺类抗生素如青霉素，将培养基中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀死，得到酵母菌．
故答案为：
（1）碳源  氮源
（2）PH
（3）高压蒸汽灭菌   灼烧灭菌
（4）对接种环灼烧灭菌       相交（相接、相连、交叉等）
（5）酚酞     自养微生物（硝化细菌）
（6）根据菌落颜色，首先分离出金黄色葡萄球菌，然后向培养基中加入伊红美蓝，将变为紫色，带有金属光泽的菌落分离出来，得到大肠杆菌，然后加入非磺胺类抗生素如青霉素，将培养基中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀死，得到酵母菌

点评：本题考查微生物培养和利用的有关知识，意在考查考生能理解生物实验的目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能．