Question

【题目】回答下列有关微生物工程的问题。乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

（1）表中的培养液pH均为7．0，若要筛选微生物L，则不能选择表中的_______培养液。

培养液	乳糖	乳糖酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgS4O7H2O	FeSO4
A	25g/L				1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
B			3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
C	25g/L	1ug/L		3g/L	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
D	25g/L		3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L

（2）为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落，可采用_______法将初筛菌液接种在固体培养基上。

（3）扩大培养微生物L时，通过增加营养物质的浓度_____________（可以//不可以）提高种群密度，分析说明原因_____________。

（4）在乳糖酶提取纯化的过程中，应及时检测___________。将酶固定化后，则有利于酶的__________。

（5）研究人员用筛选到产乳糖酶的高产菌株J1和J4在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图，推测菌株___________更适合用于发酵，理由是______________。

Answer 1

【答案】ABC 平板划线法或稀释涂布平板 不可以 扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长 酶活力或酶活性 回收再利用 J4 发酵过程中会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

【解析】

本题是对常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用的综合性考查，结合相关知识，灵活应用。

（1）分析题干信息可知，该实验的目的是筛选微生物L，因此所用的培养基应该是乳糖作为唯一碳源的培养基，且培养基的基本成分应包括碳源，氮源、水和无机盐，分析表格中的培养基的成分可知，A培养基缺乏氮源，微生物不能生长；B没有碳源，微生物应为无法生长，C不是以乳糖为唯一碳源，牛肉膏也可以作为碳源，因此A、B、C不能用于对筛选微生物L的培养基。
（2）接种微生物常用平板划线法或稀释涂布平板法，可将初筛菌液接种在固体培养基上。
（3）由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长，故扩大培养微生物L时，不能通过增加营养物质的比例提高种群密度。
（4）在乳糖酶提取纯化的过程中，应及时检测酶活力或酶活性。将酶固定化后，则有利于酶的回收再利用。
（5）由于发酵过程中会产热和产酸，据图中曲线可知，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，故J4更适合用于发酵。