Question

15．研究发现ω-3脂肪酸能有效促进甘油三酯水平的降低，有益于心脑血管的健康，对人体多种疾病有治疗效果．已知多种海产鱼类中含有丰富的ω-3脂肪酸，下面是培育含ω-3脂肪酸转基因奶牛过程．回答下列问题：
（1）在基因工程中，控制合成ω-3脂肪酸的基因称为目的基因，获得该基因的方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增；人工合成（化学合成）（至少写出两种）．
（2）在培育转基因牛的过程中最核心的步骤是基因表达载体的构建，运载体中能控制目的基因表达的结构是启动子、终止子等．
（3）将ω-3脂肪酸基因导人的受体细胞最好是受精卵，采用的方法是显微注射法．
（4）转基因奶牛的培育过程不仅需要基因工程技术，还必须依赖于早期胚胎培养、胚胎移植（至少两个）等技术．对ω-3脂肪酸基因是否含有在转基因奶牛中稳定遗传进行检测，常采用的方法是DNA分子杂交技术．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 （1）获得目的基因的方法：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（化学合成）．
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子，其中启动子和终止子等均能控制目的基因表达．
（3）培育转基因动物时，最好以受精卵为受体细胞，因为受精卵的全能性最高；将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．
（4）培育转基因动物时，除了采用基因工程技术，还需要采用早期胚胎培养、胚胎移植等技术．检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）从基因文库中获取；利用PCR技术扩增；人工合成（化学合成）
（2）基因表达载体的构建     启动子、终止子   
（3）受精卵     显微注射法
（4）早期胚胎培养、胚胎移植      DNA分子杂交技术

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．