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【题目】锌指核酸酶(ZFN)是由锌指蛋白(Zn)与核酸内切酶(FokI)组成的融合蛋白.每个FokI单体与3个锌指蛋白单元相连,构建一个ZFN.通过3Zn的组合可构建识别不同序列的ZFN.当2ZFN的识别位点相距恰当的距离时,2ZFN就形成二聚体产生酶切功能.图1表示锌指核酸酶的作用过程,其中虚线段之间为6个碱基对.

1)据图1分析,在锌指核酸酶中,识别特定核酸位点的结构是_____,切断相邻核苷酸之间化学键的结构是_____

2)据图1分析,一个ZFN单体能识别_____个碱基的特定序列,图1中的2ZFN单体识别的碱基序列_____(相同/不相同).

双链DNA分子中常存在48对碱基序列,呈旋转对称回文结构.不同的回文结构能被不同的限制酶识别并切割,如下表所示.回文序列也可通过构建相应的锌指核酸酶进行切割.图2为一段已知的碱基序列.

表:识别的回文序列及切割位点

限制酶

BamH

Hind

EcoR

Sma

识别的回文序列及切割位点

3)表中能够对图2序列进行切割的酶是__,并将该限制酶切割所产生的末端序列在下边方框中补充完整___.若要得到相同的末端,所构建的ZFN链上的识别序列是_____(从左到右书写).

4)理论上,通过不同锌指蛋白单元的组合,ZFN可以酶切DNA片段上任意的部位.那么理论上一个锌指蛋白单元有_____种,由其构成的ZFN_____种.

【答案】锌指蛋白 FokI 9 不相同 EcoR I ACGTGCCGA 64 643

【解析】

分析图1:锌指核酸酶(ZFN)是由3个锌指蛋白(Zn)与1个核酸内切酶(FokI)组成的融合蛋白,每个锌指蛋白能识别3个碱基,因此一个ZFN单体能识别9个碱基的特定序列;图中左侧ZFN单体识别的序列为GCG-GGT-GGG,而右侧ZFN单体识别的序列为GCG-GGT-GCG,因此这2ZFN单体识别的碱基序列不相同。

1)由图1可知,在锌指核酸酶中,识别特定核酸位点的结构是锌指蛋白,切断相邻核苷酸之间磷酸二酯键的结构是核酸内切酶(FokI)。

2)由图1可知,一个ZFN单体包括一个FokI单体与3个锌指蛋白,其中每个锌指蛋白能识别3个碱基,因此一个ZFN单体能识别9个碱基的特定序列;图1中的2ZFN单体识别的碱基序列不相同(左侧ZFN单体识别的序列为GCGGGTGGG,而右侧ZFN单体识别的序列为GCGGGTGCG)。

3)对照图2和表中四种限制酶的识别序列可知,表中能够对图2序列进行切割的酶只有EcoRI,由于EcoRI的识别序列为GAATTCCTTAAG,且切割位点在GA之间,因此用该酶切割后产生的末端序列为.若要得到相同的末端,所构建的ZFN在①链上的识别序列是限制酶EcoRI的识别序列的后9个碱基序列,即ACGTGCCGA

4)一个锌指蛋白单元对应3个碱基,每个ZFN3个锌指蛋白单元,因此理论上一个锌指蛋白单元有4×4×464种,由其构成的ZFN64×64×64643种。

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【题目】长翅红眼雄蝇与长翅红眼雌蝇交配,产下一只染色体组成为XXY的残翅白眼雄蝇。已知翅长、眼色基因分别位于常染色体和X染色体上,在没有基因突变的情况下,与亲代雌蝇参与受精的卵细胞一同产生的三个极体,其染色体组成及基因分布正确的是(A一长翅,a-残翅,B一红眼,b一白眼)( )

A.③B.①③

C.②④D.②③

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B.细胞中PEPCKI浓度过高可能导致糖尿病的发生

C.抑制PEPCKI乙酰化为治疗和预防糖尿病提供可能

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2)一般情况下,下列能发生图1所示过程的细胞是_____

AB淋巴细胞 B.精细胞 C.肌肉细胞 D.神经细胞

3)下列关于图1中各检验点的分析合理的是_____

A.未完成DNA复制的细胞可能无法通过检验点1

B.若细胞通过了检验点2,细胞就能完成分裂

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4)据图2分析,cyclinB_____期开始合成,下列关于CDK1活性和cyclinB含量之间关系的分析不合理的是_____

AcyclinB含量随CDK1活性增强而增加

BCDK1活性与cyclinB含量呈正相关

CCDK1活性增强可能依赖于与cyclinB的结合

DCDK1活性下降是因为cyclinB被降解

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【题目】下图表示三个通过突触相连接的神经元,电表的电极连接在神经纤维膜的外表面。刺激a点,以下分析不正确的是(

A.a点受刺激时膜外电位由正变负

B.电表①会发生两次方向不同的偏转

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1)图甲中标号可被碱性染料着色。中学实验常用的属于这类染色剂的有____________溶液。(举一例)

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3)与甲图中的细胞相比,固氮菌细胞在结构上最主要的特点是_________________

4)假如图乙细胞分泌的物质X是胃蛋白酶,则与其合成、运输与分泌的相关结构是_________________,其中部分结构的膜面积会发生不同程度的变化,这说明生物的特性为_________________

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6)若图丙所示的次级卵母细胞占该类细胞总数的4%,则连锁基因间的交换值为___________。如该动物与异性测交,产生基因型为AaDdee的个体理论上占_____

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实验报告

材料用具:

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2)研究发现NaHSO3增加了叶片内叶绿体形成ATP的能力,推测其作用部位是叶绿体的_____.研究小组利用上述条件进一步实验,用0.2mol/L硫酸甲酯吩嗪(PMS)替代1mmol/LNaHSO3喷洒在甲、乙两组的水稻叶片上,实验结果见图2;用0.2mol/L硫酸甲酯吩嗪(PMS)和1mmol/LNaHSO3混合后喷洒在甲、乙两组的水稻叶片上,实验结果见图3

3)用柱形图绘制出光照强度为1000molm2s1条件下的三组实验结果.____

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