Question

17．痤疮丙酸杆菌引发免疫反应造成了青春痘，某公司靶向定位细菌内CAMP基因，该基因编码CAMP蛋白对宿主细胞有杀伤作用．若CAMP抗体与细菌产生的CAMP蛋白相结合，即可抑制该细菌对宿主细胞的影响．其研究流程如下：
CAMP基因$\stackrel{导入}{→}$萝卜$\stackrel{少量的萝卜叶撒入小鼻腔}{→}$提取小鼠体内CAMP蛋白抗体$\stackrel{→}{混合}$痤疮丙酸杆菌菌落→注入小鼠
（1）不能将CAMP基因直接导入萝卜细胞的原因是目的基因不能在小鼠细胞稳定存在和表达，因此需构建基因表达载体，将基因表达载体导入萝卜细胞的常用方法是农杆菌转化法，其中用作运载体的是Ti质粒．
（2）检测在萝卜细胞中CAMP基因是否编码产生CAMP基因是否编码产生CAMP蛋白，应用抗原-抗体杂交方法，若出现杂交带，则说明该基因能正常表达．
（3）现该公司预生产特异性强、灵敏度高并可大量制备的CAMP蛋白抗体，应采用单克隆抗体技术，最终可在细胞培养液或小鼠腹水中获取CAMP蛋白抗体．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
第二步：基因表达载体的构建
第三步：将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等．
第四步：目的基因的检测和表达
1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术．
2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交．
3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交．
4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定．如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状．

解答 解：（1）由于目的基因不能在小鼠细胞稳定存在和表达，因此不能将CAMP基因直接导入萝卜细胞，因此需构建基因表达载体，将基因表达载体导入萝卜细胞的常用方法是农杆菌转化法，其中用作运载体的是Ti质粒．
（2）检测在萝卜细胞中CAMP基因是否编码产生CAMP基因是否编码产生CAMP蛋白，应用抗原-抗体杂交方法，若出现杂交带，则说明该基因能正常表达．
（3）单克隆抗体的优点有：特异性强、灵敏度高、化学性质单一等．单克隆抗体技术，最终可在细胞培养液或小鼠腹水中获取CAMP蛋白抗体．
故答案为：
（1）目的基因不能在小鼠细胞稳定存在和表达        基因表达载体       农杆菌转化法      Ti质粒
（2）抗原-抗体杂交                   杂交带
（3）单克隆抗体             小鼠腹水

点评 本题考查了基因工程和单克隆抗体制备的有关知识，要求学生能够掌握基因工程的操作步骤，识记目的基因导入受体细胞以及目的基因鉴定与鉴定的方法，识记单克隆抗体制备的过程和优点，再结合题意准确作答．