Question

2011年3月，日本大地震遇难人员遗体无法确认身份的，事后的遗体辨认可借助于DNA杂交技术，即从遗体细胞与死者家属提供的死者生前生活用品中分别提取DNA，然后借助DNA杂交技术对遗体进行确认．据此回答：
（1）为了确保辨认的准确性，需要克隆出较多的DNA样品，这需借助PCR技术．使用PCR技术的具体操作顺序是：按配方准备好各组分→

 

→离心使反应液集中在离心管底部→设计好PCR仪的循环程序→进行PCR反应．
请写出上述实验操作顺序空格中的实验步骤：

 

，该步操作应特别注意的问题是

 

．
（2）如表所示为分别从死者遗体和死者生前的生活用品中提取的三条相同染色体上的同一区段DNA单链的碱基序列，根据碱基互补配对情况进行判断，A、B、C三组DNA中不是同一人的是

 

．

	A组	B组	C组
遗体中的DNA碱基序列	ACTGACGGTT	GGCTTATCGA	GCAATCGTGC
家属提供的DNA碱基序列	TGACTGCCAA	CCGAATAGCA	CGGTAAGACG

（3）为什么从死者体细胞与死者家属提供的其生前生活用品中分别提取的DNA可以完全互补配对？

 

．

Answer 1

考点：PCR技术的基本操作和应用,DNA分子的多样性和特异性

专题：

分析：PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝．这项技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题，被广泛地应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等领域．DNA杂交技术方法是从遗体细胞和死者家属提供的死者生前的生活用品中分别提取DNA，在一定温度下，水浴共热，使DNA氢键断裂，双链打开．若两份DNA样本来自同一个体，在温度降低时，两份样本中的DNA单链通过氢键连接在一起，若不是来自同一个体，则两份样本中的DNA单链在一定程度上不能互补，DNA杂交技术就是通过这一过程对面目全非的死者身份进行辨认的．

解答： 解：（1）使用PCR技术的具体操作顺序是：按配方准备好各组分→用微量移液器将各组分依次加入微量离心管中→离心使反应液集中在离心管底部→设计好PCR仪的循环程序→进行PCR反应．将各组分依次加入微量离心管前应特别注意PCR实验使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌．
（2）如表所示为分别从死者遗体和死者生前的生活用品中提取的三条相同染色体上的同一区段DNA单链的碱基序列，根据碱基互补配对情况进行判断，只有A能与完全互补配对，故三组中DNA中不是同一人的是B、C．
（3）由于人体所有体细胞均由一个受精卵有丝分裂产生，其细胞核中均含有相同的遗传物质，故从死者体细胞与死者家属提供的其生前生活用品中分别提取的DNA可以完全互补配对．
故答案为：
（1）用微量移液器将各组分依次加入微量离心管中　PCR实验使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
（2）B、C
（3）人体所有体细胞均由一个受精卵有丝分裂产生，其细胞核中均含有相同的遗传物质

点评：本题考查PCR技术和DNA分子中碱基排列顺序的多样性和特异性的应用，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题．