Question

下图一是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程并说明理由。______________________________。
（2）③过程断开的化学键名称为_____________，在体外PCR操作时实现该过程的处理方法为______________。
（3）若A中共有a个碱基对，其中腺嘌呤有b个，则③④⑤过程进行3次，至少需要提供鸟嘌呤脱氧核苷酸________个；利用PCR进行扩增时，除了4种脱氧核苷酸原料，还需加入________________________。
（4）为使过程⑧更易进行，可用_____________（试剂）处理大肠杆菌；为检测⑧过程是否成功，可将处理后的大肠杆菌置于_________________培养基上培养。
（5）将基因导入大肠杆菌获得的胰岛素还需进一步加工才具有活性，据此请你设计更好的方法制备胰岛素。（只需思路，不用具体步骤）_______________________________________。

Answer 1

（1）不能，皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，不能形成胰岛素mRNA
（2）氢键；         高温加热
（3）7（a-b）；      引物和热稳定的DNA聚合酶
（4）Ca²⁺处理；      含抗生素的选择培养基
（5）将胰岛素基因导入真核生物细胞内（如哺乳动物乳腺细胞）

解析试题分析：（1）胰岛素基因在胰岛B细胞中表达，在皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，所以不能选择皮肤细胞来完成①过程。（2）DNA分子双链通过氢键相连；PCR中通过高温加热使氢键断开。（3）复制3次增加7个DNA分子，每个DNA分子中鸟嘌呤有a-b个，共需要7（a-b）；PCR扩增时，需要引物和热稳定的DNA聚合酶。（4）将目的基因导入微生物需要用Ca²⁺处理；选择培养可筛选出导入成功的大肠杆菌。（5）分泌蛋白的修饰加工需要内质网和高尔基体，所以制备胰岛素可用真核生物细胞。
考点：本题考查基因工程相关知识，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。