Question

【题目】某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验．
（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将而使周围环境的PH上升，在的培养基中加入指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数．
（2）实验简要步骤： ①土壤取样并制备培养基：用法对培养基进行灭菌．
②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行 ， 再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上．
③培养、观察与计数．
（3）有同学发现，稀释倍数为104的5个平板上，长出的菌落数分别为9，147，150，153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为个．
（4）某些同学想将分离出的目的菌在﹣20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的（填化学物质）．

Answer 1

【答案】
（1）尿素分解成氨；以尿素为唯一氮源；酚红
（2）高压蒸汽灭菌；系列梯度稀释
（3）1.5×1010
（4）甘油
【解析】解：（1）分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将尿素分解成氨 而使周围环境的PH上升．为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色．（2）①培养基灭菌需要用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌．②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行系列梯度稀释，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上．（3）有同学发现，稀释倍数为104 的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为 个．（4）某些同学想将分离出的目的菌在﹣20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的甘油． 所以答案是：（1）尿素分解成氨 以尿素为唯一氮源 酚红（2）①高压蒸汽灭菌 ②系列梯度稀释（3）1.5×1010（4）甘油