Question

2．图中甲是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止产生质粒和目的基因自身连接产物．
（2）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶．重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了筛选．
（3）从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是DNA（人乳铁蛋白基因）转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质（人乳铁蛋白）．
（4）该雌性转基因牛经与普通雄性个体交配所产的雌性后代是否也能分泌含人乳铁蛋白的乳汁？为什么？不一定，因为该雌性转基因牛产生的卵细胞中可能含人乳铁蛋白基因，也可能不含．

Answer 1

分析 分析图甲：①表示将目的基因导入受精卵；②表示早期胚胎培养过程；③表示胚胎移植过程；④表示妊娠；⑤表示转基因奶牛产生目的基因产物．
分析表格：已知一线性DNA序列共有5000bp，线性DNA经A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4个片段，说明酶A有3个切割位点；再经B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp没有被切割，说明酶B有2个切割位点．

解答 解：（1）只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用DNA连接酶连接时，会导致质粒和目的基因自身环化；而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身环化．
（2）将目的基因和运载体连接起来需要DNA连接酶的催化．重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了筛选含有重组DNA的受体细胞．
（3）雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是DNA（人乳铁蛋白基因）转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质（人乳铁蛋白）．
（4）该雌性转基因牛相当于杂合子，因此该雌性转基因牛产生的卵细胞中可能含人乳铁蛋白基因，也可能不含，其与普通雄性个体交配所产的雌性后代也不一定能分泌含人乳铁蛋白的乳汁．
故答案为：
（1）产生质粒和目的基因自身连接产物
（2）DNA连接   筛选
（3）DNA（人乳铁蛋白基因）转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质（人乳铁蛋白）
（4）不一定．因为该雌性转基因牛产生的卵细胞中可能含人乳铁蛋白基因，也可能不含

点评 本题难度适中，属于考纲中识记、理解层次的要求，着重考查了基因工程的限制酶的作用特点、启动子的功能、目的基因导入动物细胞的方法等相关知识，要求考生具有一定的识图能力，并能识记相关基础知识．