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    （12分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条 72个碱基的 DNA单链，两条链通过 18个碱基对形成部分双链 DNA片段，再利用 Klenoｗ酶补平，获得双链 DNA，过程如图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

     （1）Klenoｗ酶是一种         酶，合成的双链DNA有       个碱基对。

    （2）获得的双链 DNAＥcoRI（识别序列和切割位点-G↓ AATTC-）和 BamHI（识别序列和切割位点-T↓TATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA测序验证

    ①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它               。

    ②设计ＥcoRI和 BamHI双酶切的目的是               。

    ③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有            。

    （3）经 DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                    。

       （4）人工合成的目的基因与人体内的降钙素基因在结构上不同之处在于      。

       （5）如果从人体细胞中直接提取目的基因并导入细菌中，能否获得降钙素，为什么？

     

    【答案】

    （12分）（1）DNA聚合酶126（2分）

       （2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少（2分）

           ②保证目的基因和运载体定向连接（或防止目的基因和运载体在酶切后产生的末端发生任意连接）（2分）

           ③标记基因（1分）

       （3）合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象（1分）

       （4）人工合成基因无人降钙素基因中的内含子序列（1分）

       （5）不能（1分），因为直接提取的目的基因中包含内含子与外显子序列，导人细菌中，细胞不能识别内含子区段，而会全部进行编码．台成的多肽则不是降钙素（2分）

    【解析】

     

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年湖南省益阳市一中高二上学期期末考试理科生物试卷（带解析） 题型：综合题

    降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：   

    （1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
    （2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
    （3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             。
    （4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（  ）
    A．蛋白质工程以基因工程为基础          
    B．蛋白质工程就是酶工程的延伸
    C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  
    D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

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    科目：高中生物 来源：2010年陕西省五校高三第一次模拟考试理综生物试题 题型：综合题

    （选修3—现代生物科技专题）（15分，（2）②3分，其余每空2分）。
    降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

    在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
    （1）Klenow酶是一种＿＿＿＿＿酶，合成的双链DNA有＿＿＿＿＿个碱基对。
    （2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
    ①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    ②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（3分）。
    ③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有＿＿＿＿＿。
    （3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    （4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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    科目：高中生物 来源：2013届海南省琼海市嘉积中学高三下学期第一次月考生物试卷（带解析） 题型：综合题

    （1）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图所示。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

    ①上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是               。
    ②Klenow酶是一种           酶，合成的双链DNA有           个碱基对。
    ③获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
    A:设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是                                             。
    B:要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有           。
    ④经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                                            。
    (2)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题。

    ①在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
    ②形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是____________
    __________________________________。
    ③如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_______和________等特点。
    ④在胚胎移植技术的基本程序中，冲卵以后，要对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应该发育到         或者囊胚阶段。
    ⑤上图中所示的生物技术包括有核移植、________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。

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    科目：高中生物 来源：2013届江苏省高二上学期期末考试生物试卷选修（解析版） 题型：综合题

    （9分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。据图回答：

    （1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的       出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

    （2）图2示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图2显示的方法外还有                  。

    （3）对图2中a点的操作时，需要的酶有                 和                  。

    （4）目的基因插人质粒后 ，不能影响质粒的            

    （5）将基因表达载体导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理，使之成为         的细菌。

    （6）上述制备新型降钙素，运用的现代生物工程技术是                  。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届湖北省襄阳市高二上学期期中考试生物试卷 题型：选择题

    降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象，获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点－G↓AATTC－)和BamHⅠ(识别序列和切割位点－G↓GATCC－)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是

    A．Klenow酶是一种DNA聚合酶

    B．合成的双链DNA有72个碱基对

    C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

    D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

     

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