Question

20．炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外．由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病．对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过如图所示的实验确诊．请据图回答下列问题：

（1）噬菌体的主要化学成分是DNA和蛋白质，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于寄生．
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是稀释涂布平板法和平板划线法，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用甘油管藏的方法．
（3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是高压灭菌，该培养基所用的碳源为有机碳（无机碳/有机碳）．
（4）在过程⑧中细菌大量繁殖，并因为代谢产物的积累而使液体培养基变浑浊．取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（高或低），则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．

Answer 1

分析 1、噬菌体是专门寄生在细菌体内的病毒，该病毒是由DNA和蛋白质组成的．
2、接种方法：平板划线法和稀释涂布法．
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法．
3、无菌技术的主要内容
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．

解答 解：（1）噬菌体的主要化学成分是DNA和蛋白质，噬菌体是专门寄生在细菌体内的病毒，因此上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于寄生．
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是稀释涂布平板法和平板划线法，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用甘油管藏的方法．
（3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是高压灭菌．由于炭疽杆菌属于异养生物，因此该培养基所用的碳源为有机碳．
（4）在过程③中细菌大量繁殖，并因为代谢产物的积累而使液体培养基变浑浊．取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，由于噬菌体在繁殖过程中会使大量的细菌死亡，因此若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
故答案为：
（1）DNA和蛋白质    寄生
（2）稀释涂布平板法和平板划线法    甘油管藏
（3）高压灭菌    有机碳
（4）代谢产物    低

点评 本题主要考查微生物实验室培养的相关知识，要求考生能够识记噬菌体的组成以及代谢特点，掌握微生物分离、培养、灭菌以及保存的相关方法，能够根据微生物的代谢类型确定培养的成分．