[题目]果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一.它广泛存在于细菌.酵母菌等多种微生物细胞中.某枯草杆菌含果胶酯酶基因.某酿酒酵母中含有多聚半乳糖醛酸酶基因.研究者利用基因工程技术实现了果胶酯酶基因在酿酒酵母中表达.克服了细菌作为外源基因表达系统的缺点.并且使多种有利特性集中在同一菌株.过程如图.回答下列问题.(1)细菌因� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一，它广泛存在于细菌、酵母菌等多种微生物细胞中。某枯草杆菌含果胶酯酶基因，某酿酒酵母中含有多聚半乳糖醛酸酶基因。研究者利用基因工程技术实现了果胶酯酶基因在酿酒酵母中表达，克服了细菌作为外源基因表达系统的缺点，并且使多种有利特性集中在同一菌株，过程如图。回答下列问题。

（1）细菌因繁殖快、细胞内存在易于分离的质粒等优点，最早用于外源蛋白的生产“工厂”，其缺点是没有___________（填细胞器名称），因而不具有对蛋白质加工修饰的功能。

（2）①过程获得的目的基因是___________。该基因除了利用PCR技术进行扩增外，还可以从基因文库中获取。基因文库包括基因组文库和cDNA文库，其中_____________含有某种生物的全部基因，且具有内含子。

（3）②过程重组表达载体除了含有目的基因外，还必须有启动子、_____________和 _____________等。启动子是_____________识别和结合的部位，有了它才能驱动DNA转录出mRNA，最终获得目的蛋白质。

（4）现利用目的基因制成放射性探针，如何利用此探针检测目的基因是否成功导入酿酒酵母?____________________________________________。

【答案】内质网和高尔基体果胶酯酶基因基因组文库终止子标记基因 RNA聚合酶将探针与提取的酿酒酵母DNA 杂交，如果检测到杂交带，则目的基因导入成功

【解析】

1、将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌。缺点是缺乏内质网和高尔基体，故会产生某些需要加工修饰的蛋白质。

2、目的基因的检测和鉴定：

（1）分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入：目的基因—DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出：mRNA—分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术；

（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）细菌为原核生物，可以用于外源蛋白的生产“工厂”，其缺点是没有内质网和高尔基体，因而不具有对蛋白质加工修饰的功能。

（2）根据题干，目的基因是果胶酯酶基因。该基因除了利用PCR技术进行扩增外，还可以从基因文库中获取。基因文库包括基因组文库和cDNA文库，其中基因组文库含有某种生物的全部基因，且具有内含子。

（3）为顺利表达目的基因，重组表达载体除了含有目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因等。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位。

（4）基因探针是指用放射性同位素或荧光分子标记的DNA单链，利用碱基互补配对原则，将探针与提取的酿酒酵母DNA 杂交，如果检测到杂交带，则目的基因导入成功。

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组别	处理	光合速率（mmol·m-2·s-1）	气孔导度（mmol·m-2·a-1）	相同二氧化碳浓度（mmol·m-2·s-1）	Rubisco活性（umol·m-2·s-1）
①	不遮光+清水	10．1	0．16	260	38．2
②	不遮光+DA-6	15．2	0．24	255	42．1
③	遮光+清水	8．3	0．14	278	25．3
④	遮光+DA-6	13．4	0．23	269	35．7