Question

3．如图表示培育转荧光蛋白基因克隆猪的流程，请回答有关问题：

（1）过程①表示基因表达载体的构建，其中用到的工具酶有DNA连接酶和限制性核酸内切酶．
（2）过程②最常用的方法是显微注射法．
（3）该培育流程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、细胞核移植．
（4）若要同时获得多头转荧光蛋白基因克隆猪，可在桑椹胚或囊胚期进行胚胎分割然后移植，进行该过程时应注意将内细胞团均等分割．

Answer 1

分析 分析题图：该荧光克隆猪的培育涉及了多项生物工程技术．首先导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成荧光克隆猪．该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术．

解答 解：（1）①表示基因表达载体的构建过程．该过程中首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（3）上述过程中，导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞，重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成荧光克隆猪．其中涉及到的细胞水平现代生物技术主要有动物细胞培养、细胞核移植．
（4）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．如果对囊胚进行分割时，应对内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建     DNA连接酶
（2）显微注射法
（3）动物细胞培养  细胞核移植
（4）桑椹胚或囊胚    内细胞团

点评 本题结合图解，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤中，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记动物细胞工程的相关技术及其应用；识记胚胎工程的相关技术及其应用，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．